LL-37对口腔鳞癌SCC-090细胞增殖、侵袭和凋亡的影响

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目的:口腔鳞状细胞癌(OSCC)是头颈部最常见的恶性肿瘤之一,占所有口腔癌的90%以上,是世界上第六大最常见的癌症类型。该疾病的发病因素多种多样,发病率比较高,局部侵袭性强,颈部淋巴结转移率高。治疗方法除了手术治疗,还可以根据其分期选择辅助以放化疗。口腔癌的发生和发展较为复杂,它受到基因水平的调控,基因表达又受到DNA水平、转录水平、转录后水平及蛋白水平等多层面的调控。通过分析和使用主要参与口腔鳞状细胞癌发病机制的有价值的标志物,有助于我们更加详细全面地了解疾病,继而可以选择实施针对性、个性化、实用并有效的治疗方案。因此,为了提高口腔鳞状细胞癌患者的生存率及生存质量,我们需要寻找有效的肿瘤影响因子、新型的治疗方法及抗肿瘤药物。抗菌肽(AMPs)作为机体先天免疫中的重要组成部分,它存在于人体暴露的组织及表面,可发挥多种作用,例如抗感染、抗内毒素,趋化作用,调节免疫及抗肿瘤作用。LL-37是人体内唯一的抗菌肽,有研究表明它对多种癌细胞产生作用,虽然对卵巢癌、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、恶性黑色素瘤(MM)和皮肤鳞状细胞癌(SCC)可能有促进癌细胞生长及转移的作用,但是在结肠癌、胃癌、血液系统恶性肿瘤、口腔鳞癌等肿瘤中均有一定的抗癌作用。通过LL-37对口腔鳞癌细胞的影响的研究,可能会对口腔鳞癌的治疗提供新思路及方法。用不同浓度的抗菌肽LL-37处理体外培养的口腔鳞状细胞癌细胞,对结果进行分析,以探讨不同浓度抗菌肽LL-37对口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭和凋亡的影响,为进一步评价LL-37在口腔感染防治及肿瘤治疗上的应用,提供一定的实验室研究基础。方法:体外培养OSCC细胞SCC-090,设置空白对照组、不同浓度的抗菌肽LL-37(25μg/ml,50μg/ml,100μg/ml,150μg/ml,200μg/ml),分别培养细胞一定时间后,CCK8法检测细胞的增殖情况,Annexin V/PI双染色,流式细胞术测定细胞的凋亡情况,transwell实验检测LL-37对细胞侵袭能力的影响,ELISA试剂盒检测LL-37对细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-8含量的影响。结果:1.细胞增殖-毒性测定(CCK8实验):不同浓度LL-37处理细胞后,细胞的增殖减弱,其抑制作用在一定程度上与LL-37浓度呈正相关。2.细胞凋亡实验(Annexin V/PI双染色实验):各组浓度的LL-37处理细胞后,细胞的凋亡率升高。3.细胞侵袭实验(transwell实验):与对照组相比,细胞受到不同浓度的LL-37处理后,transwell小室中细胞侵袭到下室中的计数减少,表明受LL-37作用,细胞侵袭能力减弱。4.ELISA法检测:与对照组相比,LL-37处理细胞后,细胞分泌TNF-α、IL-6、IL-8的量有所减少。结论:抗菌肽LL-37抑制口腔鳞癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞的凋亡。
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