甾体药物是临床上应用广泛的一类重要药物,常用于治疗类风湿性关节炎、哮喘、抗毒、抗肿瘤等多种疾病以及用于生育控制。甾体化合物的结构十分复杂,其药理活性的高低取决于特定位点的取代基。化学合成法应用于甾体化合物合成的主要局限性在于它的选择性较差、步骤多,尤其是在甾体母核的特定位点引入氧原子。而微生物转化法具有专一性强,立体选择性较高,副产物少等优点,故常用于留体药物及中间体的合成。已报道的具有甾体转化活性的微生物多达1500种,但成功应用工业生产的菌株有限。因此筛选新型菌株对于改进甾体生物转化效率和拓宽微生物催化在甾体工业中的应用范围至关重要。工业上主要利用丝状真菌催化甾体化合物特定位点的羟基化反应,如利用新月弯孢霉(Curvularia lunata)在11-脱氧皮质甾醇(RS)的C11β位引入羟基生产具有抗炎活性的氢化可的松。本文发现新月弯孢霉也能够转化重要甾体化合物孕酮、雄甾-4-烯-3,17-二酮(4AD)、睾酮,并利用TLC、HPLC、1HNMR、13C NMR对其相应的主要转化产物进行了分离、鉴定。鉴于真菌甾体羟化酶属于细胞色素P450酶(CYP),本文也初步探索了新月弯孢霉CYP基因在甾体底物诱导条件下的表达情况。主要研究结果如下:新月弯孢霉菌株CICC40301将孕酮,4AD和睾酮分别转化为C17α-羟基孕酮,C14α-羟基-AD,C15-羟基睾酮,确定了新月弯孢羟化酶为诱导酶。通过对新月弯孢霉在底物诱导条件下的转录组测序和生物信息学分析得到符合预期大小的27个CYP基因,同时利用RT-PCR对27个CYP基因表达的诱导性进行了初步分析,获得了1个表达差异大的羟化酶候选基因。对新月弯孢霉转化甾体化合物孕酮、4AD、睾酮的产物鉴定为进一步开发利用该菌株提供了基础数据。