【摘 要】
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阿片受体是一类具有七次跨膜结构的G蛋白偶联的受体,主要分为δ、μ、κ三种亚型,可以介导多种细胞反应,目前已知三种亚型阿片受体均能介导激活丝裂原蛋白激酶(MAPK).研究人
【出 处】
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上海医科大学 复旦大学医学院 复旦大学
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阿片受体是一类具有七次跨膜结构的G蛋白偶联的受体,主要分为δ、μ、κ三种亚型,可以介导多种细胞反应,目前已知三种亚型阿片受体均能介导激活丝裂原蛋白激酶(MAPK).研究人员在该课题中研究了与阿片受体内吞密切相关的β-arrestin蛋白和受体磷酸化在阿片受体介导的MAPK信号通路中的作用.在人胚胎肾(HEK293)细胞中瞬时转染表达野生型δ阿片受体(DOR)和κ阿片受体(KOR),特异的DOR激动剂DPDPE以及KOR激动剂U69593可以以时间和浓度依赖的方式激活KRK1/2 MAPK.激光剂前处理可以诱导MAPK信号通路的脱敏.过量表达β-arrestin1以及β-arrestin以及β-arrestin显性抑制性(dominant negative)突变体β1V53D、β2V54D不(可以抑制受体内吞)不影响阿片受体介导的ERK1/2的激活,暗示受体内吞和β-arrestin在阿片受体介导激活ERK1/2中不起重要作用.缺失包含有磷酸化位点的羧基末端的DOR突变体(DOR-T)或缺失羧基末端的KOR突变体(KOR-T)同样可以介导MAPK的激活和脱敏.而且与野生型受体相同.两种受体突变体介导ERK1/2激活依赖于激动剂浓度和刺激时间,两种受体突变介导ERK1/2激活依赖于激动剂浓度和刺激时间,在激动剂浓度为1μM或刺激时间为3分钟时,ERK1/2磷酸化水平达到高峰,约为基础水平的4倍,激动剂预处理5分钟即可使ERK1/2磷酸化明显减弱,预处理30分钟可使ERK1/2磷酸化减弱至基础水平.这些结果暗示在HEK293细胞中阿片受体羧基末端和受体磷酸化不影响受体介导EBK1/2的激活.
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