BAM22在正常和CFA炎症大鼠脊髓和背根神经节中的表达

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近来发现,内源性阿片肽牛肾上腺髓质22肽(Bovine adrenal medulla 22,BAM22)除了与μ-、δ-和κ-阿片受体结合之外,还能与感觉神经元特异性受体(sensoryneuron-specific receptor,SNSR)结合。这些研究表明BAM22可能是一个重要的内源性阿片肽。然而,BAM22在啮齿类动物脊髓水平的分布至今仍不清楚。本实验探讨BAM22在大鼠脊髓背角和背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中的分布和细胞学定位。方法:(1)采用大鼠一侧后足掌皮下注射完全弗氏佐剂(Complete Freund’s adjuvant,CFA)建立炎性痛模型。将SD雄性大鼠(250-270 g)随机分为对照组(saline组,n=6)和实验组(CFA组,n=6)。运用免疫组化技术检测了正常和CFA炎症大鼠脊髓背角及DRG中BAM22的表达。同时用双标免疫组化方法对炎症鼠的脊髓背角Fos和BAM22的共存关系进行研究。(2)对CFA炎症大鼠鞘内注射BAM22特异性抗体,分为对照组(saline组,n=7)和实验组(BAM22抗体组,n=7)。观察BAM22特异性抗体对CFA炎症模型大鼠机械性刺激阈值的影响,探讨内源性BAM22在炎症过程中的生理作用。(3)对大鼠实施机械性背根切断手术,分为假手术组(n=5)和手术组(n=5)。运用免疫组化技术检测了大鼠脊髓背角中BAM22的表达。结果发现:(1)BAM22主要表达于大鼠脊髓背角浅层和DRG中;(2)BAM22主要存在于中、小型DRG神经元中。19%DRG神经元表达BAM22。(3)切断背根后,脊髓背角浅层BAM22的表达下降了85%。提示BAM22主要存在于初级传入的中枢突,是由DRG神经元合成而来。(4)足底注射CFA产生外周炎症后,BAM22在脊髓背角浅层和DRG神经元中的表达均显著性上调,大约增加了2倍。(5)双标结果表明:在脊髓背角的Fos阳性细胞核周围有BAM22包绕,且与浅层BAM22纤维紧密联结。(6)鞘内注射BAM22抗体后,CFA诱导的大鼠机械痛觉过敏症状增强了。结果表明:脊髓背角和DRG中的BAM22参与了伤害性信息的传递。也提示:BAM22可能是DRG传入纤维中枢端阿片受体和SNSR的内源性配体。
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