【摘 要】
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前言 端粒酶是一种核糖核蛋白酶,由RNA和蛋白质组成,以自身RNA为模板逆转录合成TTAGGG重复序列,添加到真核细胞染色体末端,以维持染色体的稳定性。迄今已有两个蛋白亚单位被
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前言 端粒酶是一种核糖核蛋白酶,由RNA和蛋白质组成,以自身RNA为模板逆转录合成TTAGGG重复序列,添加到真核细胞染色体末端,以维持染色体的稳定性。迄今已有两个蛋白亚单位被克隆:端粒酶相关蛋白1(TEP1)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)。目前研究表明肿瘤组织细胞端粒酶活性高达85-90%,而在正常组织细胞端粒酶活性较低。端粒酶的活性可看作是肿瘤组织特异表现之一。 对端粒酶活性的调节可以表现在各种水平上,尤其是对其催化亚基hTERT的调节,抑制催化亚基的基因表达可抑制端粒酶的活性。实验证明抑制端粒酶活性可以抑制肿瘤细胞生长,端粒酶与肿瘤细胞生长,繁殖,衰老及肿瘤发生密切相关。榄香烯是一种诱导细胞凋亡的药物,是莪术中的主要成分,经复合乳化而制备的抗肿瘤药物。本实验主要给予不同浓度的榄香烯,观察Hela细胞的端粒酶活性及其催化亚基hTERT的基因表达水平,探讨端粒酶活性和细胞凋亡之间的关系,为进一步肿瘤治疗提供依据。 实验材料与方法 1.实验材料 1.1细胞:人宫颈癌细胞(Hela)由中国医科大学实验中心三部提供。 1.2主要试剂:榄香烯(5mg/ml)购于大连金港制药有限公司;RP-M11640,Trizol,CHARPS,AEBSF均购于美国Sigma公司;Erasol,RT-PCR,PCR试剂盒均购于日本Takara公司;其它常规试剂均为国产分析纯。 1.3主要仪器:Hitachi05PR-22离心机,台式超速离心机(Sorvall Biofuge Primor,德国),THZ-95台式恒温振荡箱,超净工作台,PCR扩增
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