【摘 要】
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内耳毛细胞是机械-电能转换器,在维持听觉和平衡觉方面有着至关重要的作用。任何原因引起的内耳毛细胞变性、坏死、缺失等均可引起感音性聋或平衡功能障碍。因此,如何能使毛
【出 处】
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中国人民解放军军医进修学院 解放军总医院 解放军医学院 军医进修学院
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内耳毛细胞是机械-电能转换器,在维持听觉和平衡觉方面有着至关重要的作用。任何原因引起的内耳毛细胞变性、坏死、缺失等均可引起感音性聋或平衡功能障碍。因此,如何能使毛细胞再生一直是耳科工作者研究的重点。 近20年的研究表明许多细胞因子对毛细胞的再生有促进作用,这些因子包括表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、脑源性生长因子(BDNF)、胰岛素样生长因子(IGFs)等等。其中,bFGF是研究最多的一种生长因子。bFGF具有广泛的生物学作用,对体外培养的胚胎神经细胞有促生长、分化的作用。多项研究表明bFGF对损伤后的毛细胞再生有促进作用。 毛细胞再生过程可能是胚胎期毛细胞分化成熟过程的再现。再生可能是因为毛细胞损伤后启动了其前体细胞或干细胞向毛细胞的转化或分化。近年来的研究发现许多“碱性螺旋—环—螺旋”(basic helix-loop-helix,bHLH)基因转录调控因子对于内耳毛细胞的发育成熟具有至关重要的作用。其中Mathl基因被认为是毛细胞分化成熟的必须基因。敲除Mathl基因的小鼠内耳不能形成毛细胞;在新生大鼠内耳过表达Mathl基因后在非感觉上皮区产生了异位的毛细胞。最新的证据表明Mathl基因导入庆大霉素致聋的成年豚鼠耳蜗后可以诱导毛细胞再生并伴有听功能的部分恢复。 UEC-4细胞是Gao等利用SV40大T抗原建立的大鼠前庭椭圆囊支持上皮细胞系,被认为可能是前庭毛细胞的前体细胞之一,体外培养时,在bFGF存在条件下可以表达早期毛细胞标记物-钙视网膜蛋白和钙调蛋白,但不能表达毛细胞特异性标记物-肌球蛋白Ⅶa(Myosin Ⅶa)。 为探讨毛细胞再生的机制以及进一步研究bFGF-Mathl基因的生物学作用,我们将该基因导入UEC-4细胞进行研究。主要结果如下: 一、转染方法的选择和优化 我们利用增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为报告基因比较了最常用
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