【摘 要】
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目的:研究通窍活血汤及其拆方对高原低氧环境下乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤转移的干预作用及机制。方法:74只SPF级雌性Balb/c小鼠随机分为正常组和模型组,造模成功后随机分为正常组、模型组、通窍活血汤组、活血组和麝香组,将所有小鼠置于模拟海拔5000m低压氧舱中饲养,每日晨起9:00分别灌胃饮用水、饮用水、通窍活血汤、活血组药液、麝香混悬液。灌胃4周,测量计算荷瘤小鼠肿瘤体积、肿瘤光子数、瘤重及抑瘤率;透
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目的:研究通窍活血汤及其拆方对高原低氧环境下乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤转移的干预作用及机制。方法:74只SPF级雌性Balb/c小鼠随机分为正常组和模型组,造模成功后随机分为正常组、模型组、通窍活血汤组、活血组和麝香组,将所有小鼠置于模拟海拔5000m低压氧舱中饲养,每日晨起9:00分别灌胃饮用水、饮用水、通窍活血汤、活血组药液、麝香混悬液。灌胃4周,测量计算荷瘤小鼠肿瘤体积、肿瘤光子数、瘤重及抑瘤率;透射电镜观察原位瘤组织病理学变化;HE染色观察肺转移灶数目及其所占肺组织的面积比例;检测血小板计数及凝血功能（APTT、TT）;免疫组化法检测乳腺癌原位瘤中血小板相关因子（CD62P、PDGFR）及血管生成相关因子（VEGF、b FGF及HIF-1α）表达水平。结果:（1）各组小鼠一般情况:通窍活血汤组及活血组原位瘤体积增长较模型组缓慢,小鼠血瘀症状较模型组为轻,肿瘤中央坏死区域较小,小鼠纳食情况较模型组好。（2）荷瘤小鼠肿瘤体积、肿瘤光子数、瘤重和抑瘤率:连续给药4周,每隔3天测量计算出小鼠原位瘤体积,根据肿瘤体积绘制生长曲线,结果显示通窍活血汤组和活血组的原位瘤体积均小于模型组;取灌胃最后一天的原位瘤体积分析,结果发现,与模型组相比,通窍活血汤组、活血组及麝香组肿瘤体积较小,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与肿瘤光子数结果呈现的抑瘤趋势一致。灌胃4周后,处死小鼠取材,称取原位瘤重量,结果发现通窍活血汤及活血组拆方有较好的抑瘤效果,与模型组相比,通窍活血汤组及活血组瘤重较小,差异有统计学意义（P＜0.05）,并且,通窍活血汤和活血组拆方的抑瘤率均超过30%。（3）透射电镜下观察荷瘤小鼠原位瘤组织病理学变化:各组原位瘤组织肿瘤细胞及微血管内皮细胞结构均存在不同程度的病变。模型组多数肿瘤细胞发生坏死,其结构欠完整,线粒体肿胀,粗面内质网扩张;血管内皮细胞核固缩,粗面内质网扩张及自噬;通窍活血汤组、活血组及麝香组多数肿瘤细胞形态结构完整,线粒体轻度肿胀,内质网轻度扩张;血管内皮细胞中可见肿胀的线粒体,粗面内质网的轻度扩张及少量自噬。其病变大致趋势为:模型组＞麝香组＞活血组≈通窍活血汤组。（4）荷瘤小鼠肿瘤转移情况:肺转移数依次为:模型组＞麝香组＞通窍活血汤组＞活血组;与模型组相比,通窍活血汤组及活血组的肺转移数差异显著（P＜0.05）;肺转移灶平均面积占肺组织比率依次为:模型组＞麝香组＞通窍活血汤＞活血组,与模型组相比,通窍活血汤组及活血组的肺转移灶面积占肺组织的比例差异显著（P＜0.05）;各组肺脏重量差异不具有统计学意义（P＞0.05）。（5）实验小鼠凝血功能（APTT、TT）:与正常组相比,模型组、活血组小鼠APTT缩短,差异有统计学意义（P＜0.05）。与模型组相比,通窍活血汤组及麝香组APTT延长,差异有统计学意义（P＜0.05）;与正常组相比,模型组、通窍活血汤组、活血组及麝香组TT缩短,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,活血组TT延长,差异有统计学意义（P＜0.05）;（6）各组实验小鼠血小板计数:与正常组及模型组相比,各药物干预组血小板计数差异不显著（P＞0.05）;（7）原位瘤组织内血小板相关因子（PDGFR、CD62P）的阳性率:与模型组相比,通窍活血汤组、活血组荷瘤小鼠原位肿瘤组织内PDGFR、CD62P阳性率降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;（8）荷瘤小鼠原位瘤组织内血管生成相关因子（VEGF、b FGF、HIF-1α）的阳性率:各组荷瘤小鼠原位肿瘤组织内VEGF、b FGF阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。与模型组相比,通窍活血汤组的HIF-1α的阳性率降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,活血组、麝香组的HIF-1α的阳性率升高,并且与模型组相比,活血组的差异有统计学意义(（P＜0.05）。结论:通窍活血汤及其拆方能有效抑制高原低氧环境下荷瘤小鼠乳腺癌原位瘤的生长及转移,其中以通窍活血汤及活血组抑瘤效果最佳,透射电镜下观察到通窍活血汤及其拆方可以改善荷瘤小鼠原位瘤内肿瘤细胞及微血管内皮细胞的病理改变,使肿瘤细胞结构更完整,较少发生坏死,血管内皮细胞的线粒体较少发生肿胀,粗面内质网较少发生扩张。进一步研究通窍活血汤及其拆方的抑瘤机制,结果显示通窍活血汤及其拆方抑制肿瘤的生长转移的机制可能与改善血液高凝状态,下调血小板相关因子（PDGFR、CD62P）的表达及调节低氧诱导因子HIF-1α的表达有关。
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