八倍体小偃麦SNTE20衍生后代的分子细胞遗传学鉴定

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长穗偃麦草[Thinopyrum ponticum(Podp.)Barkworth and Dewey,2n=10x=70]为多年生的偃麦草属植物,与小麦属亲缘关系较近,具有生长繁茂、抗多种小麦病害等优良性状,是进行小麦遗传改良的重要基因资源。利用普通小麦与十倍体长穗偃麦草杂交获得的八倍体小偃麦,是将长穗偃麦草优异基因向小麦转移的重要桥梁。本实验室在八倍体小偃麦SNTE20与普通小麦济麦22的杂交后代中,选育出多个农艺性状优良的小偃麦新种质。本研究综合利用形态学、细胞遗传学和分子生物学等方法对其进行鉴定,在明确其主要农艺性状特点的基础上,分析了其染色体组成和结构变异特点,筛选获得了其中长穗偃麦草的特异IT标记,为其在小麦遗传改良中的进一步利用奠定了基础。获得了如下主要研究结果:1.双体异代换系的鉴定。以十倍体长穗偃麦草基因组DNA为探针、以烟农15基因组DNA为封阻进行GISH分析,发现B18255-4的根尖细胞中2条染色体具有明显的杂交信号,说明其含有两条长穗偃麦草染色体;对同一个细胞进行FISH分析,发现B18255-4缺失了一对1B染色体,因此B18255-4是缺失了1对1B染色体的双体异代换系。与亲本染色体对比发现,其5AL等染色体上的杂交信号发生了明显变化,说明在发生染色体代换的同时,伴随着染色体的结构变异。在840对IT引物中,获得了14个源于第一部分同源群的特异IT标记,据此推测B18255-4中的外源染色体源于长穗偃麦草第一部分同源群。2.易位系的鉴定。以十倍体长穗偃麦草的基因组DNA作探针、以烟农15的基因组DNA作封阻,对B18164-6进行GISH鉴定,发现两条染色体的末端存在外源信号;再对同一个细胞进行FISH鉴定,发现易位发生在7DL上,据此推测其中的外源片段源于长穗偃麦草第七部分同源群。与亲本染色体相比,B18164-6的5AL等染色体具有明显的信号变化,说明其染色体发生了结构变异。3.渐渗系的鉴定。以十倍体长穗偃麦草基因组DNA作探针、以烟农15基因组DNA作封阻,对B18229-13、B18231-1、B18292-1等16个供试材料进行GISH鉴定,均未发现外源信号,说明它们是小偃麦渐渗系;再对其进行FISH鉴定,并与亲本染色体对比,发现除B18234-2外,其余15个小偃麦渐渗系均存在不同程度的信号差异,说明其染色体存在不同程度的结构变异。通过分子标记辅助鉴定,在B18235-12等6个材料中筛选获得了源于第二、第三部分同源群的7个特异IT标记。不同供试材料染色体上存在的FISH带型差异不尽相同,说明它们是不同的小偃麦渐渗系。
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