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目的:探索半夏泻心汤干预慢性萎缩性胃炎大鼠模型Wnt/β-catenin通路的效应机制,并比较不同剂量之间的效应差异。
方法:实验采用SPF级雄性Wistar大鼠,通过MNNG构建大鼠CAG模型。模型成功后造模组采用随机数字表法分为模型对照组、半夏泻心汤高剂量组、半夏泻心汤低剂量组。利用Elisa技术观察血清中IL-1β、MTL、GAS、Wnt2、β-catenin、CyclinD1、c-myc的变化;利用WesternBlot方法检测Dvl、GSK3β、APC的蛋白表达;利用PCR法观察胃组织中Wnt2、Dvl、APC、β-catinin、CyclinD1和c-myc的表达情况。
结果:①组织病理学发现,半夏泻心汤高剂量组相对于半夏泻心汤低剂量组可以更有效减轻慢性萎缩性胃炎模型胃黏膜下的炎细胞浸润和黏膜充血,对胃黏膜固有腺体减少和萎缩的恢复作用较好。②Elisa结果显示,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以明显减少IL-1β、GAS、Wnt2、β-catenin、Cyclin D1、c-myc的含量(P<0.01),增加MTL含量(P<0.01)。半夏泻心汤低剂量组可以减少IL-1β、GAS、Wnt2、β-catenin、Cyclin D1、c-myc的含量(P<0.01),增加MTL含量(P<0.01)。③Western Blot结果显示,在Wnt/β-catenin信号通路的调节方面,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以更有效的下调Dvl(P<0.01)的表达;同时上调APC(P<0.01)、GSK3β(P<0.05)。半夏泻心汤低剂量组可以下调Dvl(P<0.01);同时上调APC(P<0.05)、GSK3β(P<0.05)。④PCR结果显示,在Wnt/β-catenin信号通路的调节方面,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以更有效的下调Wnt2mRNA(P<0.05)、Dvl mRNA(P<0.05)、β-catinin mRNA(P<0.01)、CyclinD1mRNA(P<0.05)和c-myc mRNA(P<0.05)的表达;同时上调APC mRNA(P<0.05)。半夏泻心汤低剂量组可以下调Dvl mRNA(P<0.05)、β-catinin mRNA(P<0.05);同时上调APC mRNA(P<0.05)。
结论:通过实验对Wnt/β-catenin信号通路验证可以得出以下结论①半夏泻心汤可以减轻慢性萎缩性胃炎模型胃黏膜下层的炎性浸润,并有效改善胃黏膜固有腺体的减少和萎缩。②半夏泻心汤可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的异常激活,可能是半夏泻心汤治疗CAG的重要机制之一。从而抑制胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞的增殖并加速其凋亡,阻止胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞发生突变。③与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组与半夏泻心汤低剂量组均可抑制抑制Wnt/β-catenin信号通路异常激活、改善病理改变方面,且高剂量组优于半夏泻心汤低剂量组。
方法:实验采用SPF级雄性Wistar大鼠,通过MNNG构建大鼠CAG模型。模型成功后造模组采用随机数字表法分为模型对照组、半夏泻心汤高剂量组、半夏泻心汤低剂量组。利用Elisa技术观察血清中IL-1β、MTL、GAS、Wnt2、β-catenin、CyclinD1、c-myc的变化;利用WesternBlot方法检测Dvl、GSK3β、APC的蛋白表达;利用PCR法观察胃组织中Wnt2、Dvl、APC、β-catinin、CyclinD1和c-myc的表达情况。
结果:①组织病理学发现,半夏泻心汤高剂量组相对于半夏泻心汤低剂量组可以更有效减轻慢性萎缩性胃炎模型胃黏膜下的炎细胞浸润和黏膜充血,对胃黏膜固有腺体减少和萎缩的恢复作用较好。②Elisa结果显示,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以明显减少IL-1β、GAS、Wnt2、β-catenin、Cyclin D1、c-myc的含量(P<0.01),增加MTL含量(P<0.01)。半夏泻心汤低剂量组可以减少IL-1β、GAS、Wnt2、β-catenin、Cyclin D1、c-myc的含量(P<0.01),增加MTL含量(P<0.01)。③Western Blot结果显示,在Wnt/β-catenin信号通路的调节方面,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以更有效的下调Dvl(P<0.01)的表达;同时上调APC(P<0.01)、GSK3β(P<0.05)。半夏泻心汤低剂量组可以下调Dvl(P<0.01);同时上调APC(P<0.05)、GSK3β(P<0.05)。④PCR结果显示,在Wnt/β-catenin信号通路的调节方面,与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组可以更有效的下调Wnt2mRNA(P<0.05)、Dvl mRNA(P<0.05)、β-catinin mRNA(P<0.01)、CyclinD1mRNA(P<0.05)和c-myc mRNA(P<0.05)的表达;同时上调APC mRNA(P<0.05)。半夏泻心汤低剂量组可以下调Dvl mRNA(P<0.05)、β-catinin mRNA(P<0.05);同时上调APC mRNA(P<0.05)。
结论:通过实验对Wnt/β-catenin信号通路验证可以得出以下结论①半夏泻心汤可以减轻慢性萎缩性胃炎模型胃黏膜下层的炎性浸润,并有效改善胃黏膜固有腺体的减少和萎缩。②半夏泻心汤可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的异常激活,可能是半夏泻心汤治疗CAG的重要机制之一。从而抑制胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞的增殖并加速其凋亡,阻止胃黏膜上皮层细胞和固有层细胞发生突变。③与模型组相比,半夏泻心汤高剂量组与半夏泻心汤低剂量组均可抑制抑制Wnt/β-catenin信号通路异常激活、改善病理改变方面,且高剂量组优于半夏泻心汤低剂量组。