【摘 要】
：
该研究围绕着osRACD蛋白的生化特性、osRACD基因启动区的光调节特性以及组织专一表达调节特性开展了如下几方面的工作:1.以光敏核不育农垦58S和农垦58N为实验材料,分别进行了
论文部分内容阅读
该研究围绕着osRACD蛋白的生化特性、osRACD基因启动区的光调节特性以及组织专一表达调节特性开展了如下几方面的工作:1.以光敏核不育农垦58S和农垦58N为实验材料,分别进行了长日照光周期和短日照光周期处理.2.将osRACD分别克隆在原核表达载体pET28a(+)和pGEX-4T上,构成重组质粒pET-osRACD和pGEM-osRACD,并分别转化给大肠杆菌BL-21(DE3)菌株.提取经IPTG诱导后的转化子菌株的蛋白质,分别通过Ni螯合的金属层析柱以及谷胱甘肽琼脂糖珠纯化,分离到纯度在90﹪以上的His-osRACD以及GST-osRACD融合蛋白.GST-osRACD经凝血酶因子切割后,最终获得了单一的osRACD蛋白质.3.通过用反向PCR技术,分离得到osRACD基因约1.4kb的启动区片段,并将经六种限制性内切酶酶切后所获的限制片段,进行凝胶阻滞检测.研究结果显示,在osRACD基因启动区中CD(-799到-686)和DX区段(-686到-431)中,可能包含有光周期应答的顺式元件.4.通过DNaseI足迹法分析osRACD启动区中的DX区段(-686~-431),结果显示一个长度21bp的序列(5TTAATTCCAACTTTCAATTCT3)是58S-SD水稻幼穗核蛋白提取物特异结合的顺式元件,我们将该元件命名为LRE.利用DNA亲和层析技术,以LRE作诱饵,目前分离得到一个特异的蛋白组分E1,它可能包含了与LRE作用的转录因子成分.SDS-PAGE及双向电泳均显示其是由多个蛋白组成的复合物.5.RT-PCR以及原位杂交分析表明,osRACD基因仅在58S-SD育性水稻的花药中特异表达,在根、茎组织中表达水平很低.通过构建了一系列含有启动区缺失片段与gus报告基因的植物表达载体,应用Northern分析和GUS荧光检测等技术分析了这些表达载体的转基因烟草中的GUS表达活性.结果证明,全长的osRACD启动区,具有调节gus基因在烟草雄蕊中特异表达的能力,而缺失了osRACD基因启动区中osDP5区段(-182~107),明显降低了gus基因在雄蕊中的表达水平.
其他文献
造价预算工作对于建筑企业来说至关重要,影响着整个项目的经济收益,对工程项目的质量起到关键作用.企业需要进行造价预算管理的科学化与规范化,通过提升管理力度与管理水平,
本文分析了施工行业房建工程项目机械设备和高处作业安全管理存在的突出问题和普遍做法,作者通过自身实践总结了管理经验,提出了改进建议和管理思路,供大家参考.
动态管理以及控制作为整个建筑施工成本控制、精细化管理的重要基础,是对建筑工程造价总成本合理调整的重要保证,而且也是保障整个施工成本目标控制在后期更进一步优化的重要
转基因作物产品的创制已经由传统的单一性状转变为多基因性状。多数转基因作物需要通过杂交将外源基因由实验室品种导入优良品种。对于二倍体作物来说，转化“x”个外源基因，F2
进入21世纪之后二氧化碳过度排放、能源短缺、空气污染成为了世界面临的三大问题，其中汽车尾气的排放和汽油的消耗是导致这三大问题的重要原因。大力发展电动汽车产业是有效缓
基于水稻两个亚种indica与japonica已被证实的高度共线性,在本中心1997年构建的第一代水稻基因组物理图的基础上,结合指纹法、分子标记锚标定位STC-PCR等技术,构建了构建了水稻籼稻广陆矮4号(GLA4)与粳稻日本晴(Nipponbare )4号染色体的物理图,并据此最终完成了Nipponbare 4号染色体的精确测序工作。完成序列(finished sequence)全长34.6 M
该文从传统分类、化学分类和系统发育学分析等方面对链霉菌进行了多相分类研究,并探讨了全细胞蛋白SDS-PAGE指纹图谱分析,ARDRA分析等快速分类方法用于生物活性链霉菌分离株
目前，全世界的两栖动物正面临着种群衰退和灭绝的巨大威胁，而新兴的由壶菌（Batrachochytrium dendrobatidis）感染引起的两栖动物传染病——壶菌病是近年来导致两栖类种群数量急剧
烟曲霉是一种常见的、通过空气传播的腐生真菌,是一种条件致病真菌,可在因接受化疗、骨髓移植的病人或其他免疫缺损人群中引起肺炎或其它致死的侵入性感染.Chi44是烟曲霉(Asp
电力网络拓扑分析是电网能量管理系统(EMS)和配网自动化管理系统(DMS)中,潮流计算和电网安全分析等功能模块的基础,拓扑结果的准确性直接影响着这些应用软件的使用效果。由于现有电网的规模日益庞大,结构日益复杂,采用人工方式进行的电网能量管理系统(EMS)的建模工作非常繁琐,常由于人员操作错误导致电网模型文件中出现网络元件之间连接关系错误或缺失等现象,影响了电网拓扑结果的准确性。本文从电网设计的一般