黑曲霉由于具有高效的蛋白分泌能力而在糖化酶的工业生产中得到广泛利用。在前期试验中，本课题组基于恒化培养试验结果构建的黑曲霉发酵过程宏观动力学模型（黑箱模型），在500 L发酵罐进行指数补料培养中试放大时，发现最终发酵酶量较模型模拟值有明显的下降。本文探究了造成500 L中试放大结果出现较大差异的原因，用于指导后续基于黑箱模型的500 L中试放大过程。　　本文首先对实验室规模5L反应器的混合与传质特征进行了初步研究，为后续实验设计提供指导。然后在5L罐上研究了氧限制和不限制条件下培养的种子对于黑曲霉发酵产糖化酶的影响，并设计了5L指数补料分批发酵实验进一步验证了50 L氧不限制培养条件的种子会影响黑箱模型的准确性。最后，考察了底物浓度震荡和CO2对于黑曲霉产糖化酶的影响。　　5L罐分批实验结果表明，50 L反应器氧不限制条件下培养的种子会造成糖化酶产量的明显下降，并且50 L反应器氧限制条件下的种子有利于产糖化酶。而底物浓度震荡对于糖化酶产量的影响不明显。在分批发酵模式下，11％和16.5％进气体积比例的CO2会抑制细胞的生长，并且抑制程度随着进气中CO2浓度的提高而加大，同时也会影响整个批发酵过程的耗糖速率，尤其是16.5％进气体积比例的CO2，会显著延长分批发酵时间。但是在糖化酶终产量的对比上，进气含11％和20％比例CO2实验组却有着更高的YP/S，这说明CO2影响了细胞内中间代谢物与能量的平衡，在降低耗糖速率的同时降低了细胞生长，但是对于糖化酶的合成却反而有利。　　进一步在恒化培养模式下证实，当处于相对低的稀释率0.05 h-1时，进气中10.5％和15.5％ CO2对于细胞的生长并没有抑制作用，但在较高稀释率0.08 h-1下，却对于细胞的生长产生了抑制;另外，进气中CO2浓度增加促进了菌体糖化酶合成(qP)。　　本研究有关种子培养条件及CO2浓度对糖化酶发酵影响的实验结果对于糖化酶发酵优化和放大有重要借鉴意义。