羊草(Leymus chinensis)为禾本科赖草属多年生植物，是我国北方草地最重要的优质牧草之一。羊草生长速度快、耐盐碱性强(其成株可在pH高达10以上的碱性土壤中正常生长)，具有较高的经济价值和生态价值。以往研究多集中在羊草生理生态领域，并且取得一定进展，羊草分子生物学研究起步较晚，研究基础相对比较薄弱。因此，以羊草为对象开展耐碱基因的克隆与功能分析，具有较重要的科学价值和应用前景，对今后进一步从基因水平上理解羊草耐盐碱机理具有重要的科学意义。本研究通过筛选羊草自然变异体，并利用mRNA差异显示技术和RACE末端克隆技术分离、克隆羊草Na2CO3胁迫响应基因(耐碱基因)，并转化烟草分析基因功能，主要取得了以下结果：　　 建立了30个羊草无性系，并对其主要形态指标(株高、叶宽、叶长、叶色、株型)进行了聚类分析以及RAPD遗传多样性研究。采取无性扩繁的方法尽量避免了基因流和基因漂变，统一配土及水肥管理尽量减少了生境因素对其生长发育的影响，但羊草在小尺度地理范围内仍存在较高的变异，说明羊草在基因水平上具有丰富的遗传多样性。　　 采用mRNA差异显示法从100mM Na2CO3胁迫处理的羊草根和叶中分离到了22个差异片段，并通过RACE扩增技术获得其中一个片段的全长开放读码框SIGL1，将该基因构建于pCAMBIA-2300表达载体后通过农杆菌介导法转化烟草，筛选阳性转化植株后进行Na2CO3和NaCl耐性分析。初步研究结果表明转化SIGL1的烟草与NaCl的耐性无关；pH胁迫耐受实验中发现在pH9.5和pH10.0的MS培养基中转基因植株的生物量高于对照。　　 建立了羊草成熟胚组织培养及再生体系，并研究了种子发芽率、2，4-D和温度对诱导率的影响。羊草成熟胚愈伤组织的诱导率与其发芽率有直接关系，发芽率高则诱导率高，反之亦然。与以往研究结果相同，2，4-D浓度为2mg/L为羊草成熟胚愈伤组织诱导的最佳浓度，0.5mg/L为愈伤组织继代培养的最佳浓度。16℃/26℃变温培养可显著提高羊草成熟胚的愈伤组织诱导率，采用变温培养较26℃恒温培养诱导率平均为47.6％，较恒温对照提高约1倍。愈伤组织经继代后可在不添加任何外源激素的MS培养基上直接分化出根和苗，移栽至土壤中可正常生长。羊草再生系统的建立为进一步对其进行的遗传转化操作奠定了基础。