目的 分泌性中耳炎(Otitis media with effusion,OME)为耳科常见疾病,多发于儿童,发病率较高,能带来多种并发症如听力损失、言语发育障碍及中耳持续损伤等,其发病机制至今尚未明了,众说纷纭,亦无确切有效的防治方法。有研究表明,中耳黏膜受到抗原刺激时同呼吸道黏膜一样,成为免疫活性器官,从而支持这样的假说:OME 是变态反应的一种结果,最终造成 Th1 和 Th2 免疫反应失衡而引发的以中耳黏膜 Th2 免疫反应为主的变态反应性炎症。 BCG ( Bacille calmette-guerin ) 是牛型分支结核杆菌减毒活疫苗,具有很强的非特异性免疫刺激作用,接种后,可使机体产生保护性的Th1 细胞,建立一种 Th1 型免疫应答,从而抑制变应原的致敏作用和黏膜高反应状态的产生。近年来 BCG 在变态反应性疾病的防治中备受关注。 本研究应用卵白蛋白(OVA)致敏激发小鼠制成分泌性中耳炎模型,并用 BCG 干预,观察 BCG 干预后小鼠中耳鼓室黏膜中 Th1、Th2型细胞的表达情况,从而证明 BCG 作为 Th1 型免疫介导剂,能够诱导Th1 型免疫反应,调节 Th1/ Th2 平衡,抑制变态反应的发生,为临床防治分泌性中耳炎提供理论依据和实践方法。 方法 重庆医科大学硕士研究生毕业论文 5 将 24 只 BALB/C 小鼠分成 4 组,即卡介苗治疗组(BCG 组)、卵白蛋白模型组( OVA 组)、对照组Ⅰ、对照组Ⅱ。每组 6 只,其中 BCG组、OVA 组皮下注射卵白蛋白致敏,然后用卵白蛋白耳内激发两次;对照组Ⅰ皮下注射 OVA,然后 PBS 激发两次; 对照组Ⅱ则用皮下注射PBS,然后 OVA 激发两次。BCG 组在耳内激发前 3 天给予双下肢外侧皮内注射卡介苗 0.02mg,其他三组不做干预,四组分别于二次激发后第 2 天处死小鼠,中耳鼓室黏膜病理切片观察组织形态学改变,免疫组织化学观察 Il-4, Il-5, IFN-γ, Il-12 的表达情况。结果1.经 OVA 激发后 OVA 组小鼠与对照组相比,中耳鼓室黏膜出现以嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润为主的变态反应性炎症,鼓室腔出现积液,Th2 型细胞因子的表达增多。2.接种 BCG 后的 BCG 组与 OVA 组相比,中耳鼓室黏膜炎症明显减轻,炎细胞减少,鼓室腔积液减少,Th1 型细胞因子表达增多,Th2型细胞因子则明显减少,从而纠正 Th2 优势反应。3.两对照组均未表现变态反应性炎症,鼓室黏膜未见明显肿胀增生,鼓室无积液,免疫组织化学检测 Th1、 Th2 型细胞因子,均为阴性或弱阳性。结论1. 采用两次腹腔注射 OVA 致敏,连续 2 次耳内激发的方法诱导出中耳黏膜变应性炎症,从而成功地建立了分泌性中耳炎动物模型,为