外磁场下磁性纳米C3转移酶载体在大鼠脊髓损伤中的分布

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[目的]探讨磁性纳米C3转移酶载体(即异硫氰酸荧光素标记跨膜肽(TAT)-聚乙二醇(PEG)-C3转移酶磁性纳米药物载体)制备与生物相容性,观察磁性纳米C3转移酶载体在大鼠脊髓损伤局部施加外磁场后分布,并观察损伤后施加不同时间的外磁场对该载体体内分布的影响。[方法]采用薄膜分散法构建磁性纳米C3转移酶载体,检测其粒径、Zeta电位、透射电镜观察形态、测定磁场顺应性及药物释放;MTT法测定其细胞毒性;体外观察MCF-7细胞摄取药物载体情况。82只大鼠制作胸10损伤模型,随机分为5组:A组,异硫氰酸荧光素,20只;B组,载体,20只;C组,载体+外磁场15min,20只;D组,载体+外磁场30min,12只;E组,载体+外磁场1h,10只。异硫氰酸荧光素及载药微球均经尾静脉注射。A、B、C组各取10只大鼠,经尾静脉注射1h后取材,观察载药微球在肝、肾、脾及脊髓组织分布;每组各10只大鼠,经尾静脉注射1h后,取以T10为中心4cm脊髓组织,火焰原子吸收分光光度法测定其铁元素的含量;D组取2只大鼠,经尾静脉注射1h后取材,电镜观察载药微球在脊髓组织中分布。[结果]制备的磁性纳米C3转移酶载体平均有效粒径为325.6mn,且分散性好,Zeta电位值为5.62±0.01mV;药物载体磁化强度饱和度值为63.5emu/g,并缓慢释放药物;载药微球与细胞共培养,细胞平均存活率为78.10%,其细胞毒性低;与MCF-7细胞共培养5s能够在细胞内达到良好聚集效果。C组脊髓损伤中心荧光强度高于A、B组。损伤脊髓标本铁元素含量统计学分析:C组分别与A、B组比较差异有统计学意义,D组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05),D组与E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。电镜观察载体聚集在损伤中心,并且进入神经细胞内。[结论]磁性纳米C3转移酶载体具有良好的生物相容性,可作为理想的药物载体跨越血脊髓屏障。外磁场下磁性纳米C3转移酶载体能够靶向聚集损伤脊髓;施加外磁场30min,药物载体在损伤脊髓可达到较好的聚集效果。
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