Synuclein家族是近年来在脊椎动物体内发现的一个同源性较高的蛋白家族.这个蛋白家族已知包括三个成员:α-synuclein,β-synuclein和γ-synuclein.A-synuclein的突变体与罕见的家族性的早发性帕金森病有关,而且,野生型的未突变的α-synuclein会在帕金森病,阿尔茨海默氏病和其他的一些神经退行性疾病中发生不正常的沉积.而在散发性的帕金森病人的中枢神经系统,则只含有未突变的野生型α-synuclein.在尚无较好思路来进一步研究α-synuclein的生理功能以及它和两种突变体在神经退行性疾病过程中的作用分子机制之前,进行蛋白结晶并解析它们的结构,近而从结构推测它们的功能及在疾病发生中所起的作用不失为一个好的策略.我们成功的从人四月胎脑组织提取的RNA中通过RT-PCR方法获得了α-synuclein.并把它构建进入pGEX-4T-1表达载体中,通过表达纯化和结晶,得到了α-synuclein蛋白的晶体.同时,体外获得了存在于早发性家族性帕金森病人神经元内的突变体之一A53T α-synuclein的cDNA克隆.人们对于γ-synuclein的生理功能和病理作用也了解甚少,我们期望从寻找它的相互作用蛋白入手,探讨它是否与某种信号通路相关或者是同细胞骨架与核骨架有关.为此,我们从人四月胎脑组织提取的RNA中通过RT-PCR的方法获得了γ-synuclein的全长cDNA,构建了pGEX-4T-1-γ-synuclein表达载体并表达纯化了该蛋白.我们同时提取了健康脑组织蛋白,用纯化好的GST-SNCG融合蛋白及GST蛋白进行GST-PULLDOWN实验,在SDS-PAGE凝胶电泳分析后,得到了两条差异显著的蛋白条带.我们在对差异蛋白的质谱分析后得到了两个蛋白,分别是crystallin alphaB和AHI-1.现已发现,γ-synuclein在不同组织及不同组织的良、恶性状态之间,表达差异较大.我们猜测:γ-synuclein在健康脑组织和脑胶质细胞瘤组织之间的表达差异是由CpG岛的甲基化情况决定的.因此,我们分别从健康脑组织,胶质细胞瘤的瘤旁组织和胶质细胞瘤组织中提取了基因组DNA,并以PCR的方法获得了上述组织γ-synuclein的CpG岛.