背景与目的 Lactoferricin B(简称Lfcin B)是一类富含色氨酸的小分子抗菌肽,是牛乳铁蛋白(bLf)在消化道内经胃蛋白酶水解而产生。同其他抗菌肽一样,Lactoferricin B具有广谱杀菌活力,此外可能还有抑制病毒和真菌增生、抑杀肿瘤细胞等多种生物学功能,而对真核细胞几乎没有毒性。基于这种选择性效应和无抗原性的特点,Lactoferricin B有望成为新一代的抗菌、抗病毒、抗肿瘤新药。然而,天然抗菌肽的来源十分困难,无论以何种生物为来源的抗菌肽,都面临培养和提取的问题,难以保证每一批次的抗菌肽有一致的生物活性,很难满足研究和临床应用的需要。因此,利用分子生物学技术重组表达外源基因成为获取目标蛋白的最有效途径。由于抗菌肽对细菌有很强的杀伤作用,不宜在原核系统中直接表达,一般的策略是采用融合表达或在真核细胞(如酵母)中进行表达。本研究采用融合表达的方法,体外合成抗菌肽Lactoferricin B基因并克隆入大肠杆菌中,重组表达Lactoferricin B蛋白。 方法 根据Lactoferricin B的氨基酸序列,采用大肠杆菌偏爱密码子反推其基因cDNA序列,化学合成LactoferricinB基因,并将基因克隆入