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第一部分:应用免疫组织化学方法检测Srx和E-cadherin在宫颈鳞癌组织中的表达目的:通过检测硫氧还原蛋白(Sulfiredoxin,Srx)与上皮细胞粘附分子E-钙粘蛋白(E-cadherin)在正常宫颈、重度宫颈上皮内瘤变(HSIL)及宫颈鳞癌组织中的表达情况,探讨二者在宫颈鳞癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SABC法检测123例宫颈鳞癌、25例重度子宫颈上皮内瘤变(HSIL)及30例正常宫颈上皮组织中Srx和E-cadherin蛋白的表达情况,分析两蛋白与宫颈鳞癌临床病理特征的关系及两者表达的相关性。结果:Srx在宫颈鳞癌组织中呈现高表达,而E-cadherin在鳞癌组织中表达明显降低,两蛋白在三组中阳性表达率比较差异具有统计学意义,且Srx与E-cadherin蛋白表达呈负相关。宫颈鳞癌组织中Srx的表达与淋巴结转移及有无脉管浸润有关,而与患者年龄、临床分期、肿瘤大小、肿瘤浸润深度及癌组织分化程度无关。E-cadherin的阳性表达率与肿瘤大小、组织分化程度及淋巴结转移关系密切。结论:宫颈鳞癌组织中Srx的高度表达与恶性临床病理特征密切相关,并与E-cadherin蛋白表达呈负相关,提示Srx可能通过调控EMT促进宫颈鳞癌的进展。第二部分:细胞水平验证Srx可能通过EMT来促进宫颈鳞癌的侵袭和迁移能力目的:探讨干扰Sulfiredoxin(Srx)基因表达对宫颈鳞癌Siha细胞的侵袭及迁移能力的影响。方法:本实验选取宫颈鳞癌Siha细胞株,分为空白对照(Control)组,阴性对照组(Sh NT)组和实验组(Sh Srx)组。利用si RNA技术干扰Srx在Siha细胞中的内源性表达,利用定量PCR及细胞免疫荧光技术鉴定干扰效果。首先,应用定量PCR法及Western blot法检测各组宫颈鳞癌细胞中的E-cadherin和Vimentin的表达情况。然后采用Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞的侵袭和迁移能力。结果:与两对照组相比,在Srx敲低的Sh Srx组细胞中E-cadherin的表达在m RNA水平和蛋白水平均明显上升(P<0.05),而间质标志物Vimentin的表达则明显下降(P<0.05)。检测三组细胞的侵袭能力和迁移力,结果表明:与两对照组相比,在Sh Srx组细胞中,抑制Srx的表达使得该组细胞的侵袭能力和迁移力都明显受到抑制(P<0.05)。并且上述结果在两对照组间的比较无明显差异(P>0.05)。结论:Srx可能通过EMT途径来促进宫颈鳞癌Siha细胞的侵袭和迁移能力等恶性生物学行为。