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背景糖尿病神经病理性疼痛是糖尿病常见的慢性并发症。加巴喷丁作为其一线治疗药物,其镇痛效果尚不完善,作用机制尚不明确。多项研究显示加巴喷丁可抑制神经元蛋白激酶Cy (PKCy)的表达,而PKC会影响T型钙通道活性,进而导致感觉神经元兴奋性变化,并影响加巴喷丁的镇痛效果。本实验旨在通过联合应用加巴喷丁和T型钙通道阻滞剂米贝拉地尔治疗1型糖尿病大鼠神经病理性疼痛,评价T型钙通道阻滞剂对加巴喷丁镇痛效果的影响,明确加巴喷丁对大鼠脊髓背角及背根神经节(DRG) T型钙通道及PKCy的表达与活化的作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠1型糖尿病神经病理性疼痛模型,应用vonFrey法与热辐射法评估大鼠机械刺激诱发痛(机械缩足阈值,PWT)与热刺激诱发痛(热缩足潜伏期,PWL)。给予不同剂量加巴喷丁及米贝拉地尔治疗,监测大鼠PWT及PWL变化,评价联合用药方案的镇痛效果。利用RT-PCR及Western Blot评价大鼠脊髓背角与DRG中T型钙通道及PKCγ的表达改变。结果STZ诱导的1型糖尿病神经病理性大鼠体重明显低于对照组,其PWT及PWL均明显下降。米贝拉地尔l0mg/kg腹腔注射后60min糖尿病大鼠PWT(8.28±1.35mNvs.6.15±1.50mN,p<().05)与PWL(9.314±1.104s vs.6.980±0.994s,p<0.01)显著升高。加巴喷丁100mg/kg连续腹腔注射7天可显著改善大鼠PWT(8.68±1.64mN vs.4.53±1.28mN,p<0.001)。不同剂量加巴喷丁联合米贝拉地尔腹腔注射60min后糖尿病大鼠疼痛缓解程度均高于同剂量加巴喷丁组,其中加巴喷丁100mg/kg组联合米贝拉地尔lOmg/kg腹腔注射120min后糖尿病大鼠PWT(13.31±2.44mN vs.10.07±1.26mN,p<0.01)与PWL(10.243±2.139s vs.8.417±1.781s,p<0.05)仍显著高于同剂量加巴喷丁组。单用加巴喷丁30mg/kg组在注射后60min、120min均无显著镇痛效果,而联合米贝拉地尔lOmg/kg治疗后60min PWT显著升高并可达到单用加巴喷丁100mg/kg的疗效。此外,加巴喷丁100mg/kg可显著降低大鼠DRG及脊髓背角的T型钙通道及PKCy的表达。结论1、T型钙通道阻断剂米贝拉地尔可改善1型糖尿病神经病理性疼痛大鼠的疼痛行为学。2、米贝拉地尔可增强加巴喷丁对型糖尿病神经病理性疼痛大鼠的镇痛效果,从而减少加巴喷丁用量,降低药物副作用与不良反应的发生率,延长加巴喷丁有效作用时间。3、加巴喷丁可抑制1型糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓背角及DRG的T型钙通道及PKCy的表达。