RNAi沉默STAT3基因对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

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目的:已有实验证明pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒有效抑制STAT3在人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3中的表达。故此次实验旨在研究pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制效应。方法:应用人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3对15例裸鼠建立人卵巢癌皮下移植瘤模型,随机分为3组:生理盐水对照组,空质粒对照组及siRNA-STAT3重组质粒组。pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒由吉林大学前列腺疾病研究治疗中心惠赠,应用去内毒素质粒提取试剂盒提取重组质粒。用微量注射器分别将生理盐水,空质粒,pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒注射入对应组的裸鼠移植瘤内,联合电转染技术提高转染率,每隔5天重复一次,每隔3天观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况。利用Western Blot检测重组质粒对STAT3基因表达的影响,免疫组织化学技术,HE染色及TUNEL检测细胞凋亡的方法观察肿瘤组织形态及细胞凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射,对SKOV3裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制效应,与两对照组相比,裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.05)。重组质粒抑制肿瘤组织中STAT3及cyclin-D1、VEGF、survivin、c-myc基因表达,与两对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05)。免疫组化分析表明STAT3在空质粒及生理盐水对照组的肿瘤组织内呈强阳性表达,而在重组质粒组表达量明显减少。HE染色证实重组质粒组出现大片细胞核固缩、破碎等凋亡征象,TUNEL检测结果显示癌组织出现大量细胞凋亡。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能有效抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤的生长。
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