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真菌广泛的分布在自然界中,其种属繁多,是自然界中的第二大生物类群。真菌可以产生大量结构新颖、生物活性多样的代谢产物,是活性物质的宝库资源。本论文开展了食药用大型真菌和特殊生境丝状真菌生物活性物质的提取分离、结构鉴定和功能评价研究。论文工作的第一部分以我国著名食药用真菌茯苓(Wolfiporia cocos)为研究对象,对茯苓菌核水不溶性多糖(WIP)进行了分离纯化、结构表征和药效评价。分离获得一种分子量为4.486×106 Da的β-D-葡聚糖。(1)首先利用ob/ob小鼠模型对WIP改善代谢综合症的药效进行了评价,结果表明WIP多糖可以很好的改善ob/ob小鼠的高血糖、高血脂和非酒精性脂肪肝。进一步采用高通量测序,研究了 WIP对小鼠肠道细菌菌群的影响,并阐明了 WIP降糖降脂多重药效的作用机制。口服WIP多糖显著改变了ob/ob小鼠的肠道菌群的组成和结构。在属水平,显著增加了丁酸产生Lachnospiracea,Clostridium XIVa 和 Clostridium Ⅳ的丰度。与肠道菌群变化相对应,WIP组小鼠粪便中丁酸含量显著增加。同时肠道上皮ppar-γ的表达增加、紧密连接蛋白(ZO-1和Occludin)和粘膜蛋白(muc-5)的表达增加,血浆中LPS和炎症的水平降低。以上研究表明,口服WIP多糖显著富集了丁酸产生菌,增加了肠壁的完整性;通过丁酸介导的肠道上皮ppar-γ信号降低氧分压,抑制条件致病细菌。粪菌移植实验进一步验证了肠道菌群在WIP改善代谢综合征中发挥关键作用。(2)利用酒精液体饲料诱导的酒精性脂肪肝模型小鼠评价了 WIP对酒精肝的作用,结果表明WIP显著改善了酒精导致的肝脏炎症和脂质堆积。深入的机制研究表明WIP通过逆转酒精导致的厚壁菌门(Firmicutes)的降低,特别是增加丁酸产生菌丰度来维持肠道厌氧环境,从而抑制肠道LPS产生细菌和真菌的扩增。此外,在实验中通过ITS测序和体外培养获得了一株在酒精喂养条件下大量富集的真菌M guilliermondii。通过动物实验证实M.guilliermondii及其产生生理功能分子前列腺素E2促进了酒精性脂肪肝的发生、发展,是酒精肝相关的潜在肠道致病真菌。综上所述,茯苓水不溶性多糖是一种潜力巨大的益生元,本研究为茯苓的进一步开发利用奠定了科学基础,为阐明中药茯苓健脾作用的机制提供新的思路。论文工作的第二部分以一株来源于酒曲的琉球曲霉(Aspergillus luchuensis)作为研究对象,利用现代化的色谱和光谱研究手段对其产生的活性次级代谢产物进行系统的化学研究,共分离得到了 11个化合物,包括4个新的二酮哌嗪衍生物(1-4)、1 个新的 methyl 4-(3-acetyl-2,6-dihydroxyphenyl)-2-methoxybutanoate(5)和 6 个已经化合物 asperazine(6),campyrone A-C(7-9),pyranonigrin A(10)和pyranonigrin S(11)。对分离得到的化合物进行了体外抗氧化和抗肿瘤活性评价,化合物10展现了中等强度的DPPH清除活力,化合物1-4和10-11表现出了不同程度的还原能力(EC50:8.7-176.39μM),化合物1-11在200μM的浓度下对A549(人非小细胞肺癌细胞),K562(人白血病细胞),ASPC(人胰腺癌细胞)和H460(人大细胞肺癌细胞)细胞均没有毒性。上述结果表明:酒曲来源的琉球曲霉产生抗氧化活性产物,不产生毒性代谢产物,安全性高,是良好的发酵菌株。本论文的研究揭示了中药茯苓多糖调节肠道菌群治疗代谢综合征和酒精性脂肪肝的作用机理,为中药科学化、现代化提供了理论支持,拓展了中药茯苓应用范围。挖掘了酒曲琉球曲霉新结构活性次级代谢产物,丰富了真菌天然产物库。