本实验室筛选到的一株黑曲霉（Aspergillus niger）M-1，能产生转苷活性较强的α-葡萄糖转苷酶。论文报道了利用大肠杆菌作为宿主菌克隆表达黑曲霉（Aspergillus niger）M-1菌株的α-葡萄糖苷酶基因的研究结果。 以黑曲霉（Aspergillus niger）M-1的总RNA为模板，利用RT-PCR扩增α-葡萄糖苷酶的cDNA，0.8％琼脂糖凝胶电泳分析片断大小为3.0Kb；经测序验证后重组到Trc启动子控制下的表达载体pSE380中，构建重组质粒pSE-αtg；重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）中，经IPTG（1mmol／L）诱导4h后，破胞提取菌体总蛋白，SDS-PAGE表明重组产物为一分子量为110kDa的蛋白质，与M—1菌株的α-葡萄糖苷酶分子量大小相近。 对重组酶的粗酶液进行了酶学性质的初步研究，表明：重组酶在pH为6.0～7.0之间保持稳定，以pH为7.0时最稳定；重组酶在30℃—50℃范围内稳定，温度超过50℃酶活力大幅度下降，在45℃时最稳定；结果表明Cu2+、Mn2+对重组酶的活力均有明显的促进作用，而Fe3+、Zn2+、CO2+离子则对重组酶的活力有一定程度的抑制作用：在粗酶液中添加Cu2+浓度至1.5mmol／L时测得酶活力最大，为对照管的3倍。以25％的麦芽糖为底物，经HPLC分析有6种糖类成分，证明重组酶具有转苷活性。 以产酶最高的CB7重组菌株作为研究对象，初步研究了重组菌产酶条件：IPTG的添加浓度为1.6mmol／L时重组菌产酶量最高；IPTG的最佳诱导时间为4h；在培养基中添加Mn2+对重组菌产酶的促进作用最显著，Mn2+的最佳添加浓度为0.08mmol／L；在培养基中添加麦芽糖对重组菌产酶有较大的诱导作用，其酶活为对照样的1.31倍；在诱导开始后的第三个小时添加葡萄糖对重组菌产酶有较大的促进作用，其酶活为对照样的1.78倍；以乳糖代替IPTG进行诱导表达，乳糖浓度为4.0mmol／L时重组菌产酶最高。