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维生素B12是一种必须通过食物获得的微量营养素,可以高效地从日粮中转移到鸡蛋中。人类由于饮食不足引起的维生素B12缺乏已成为全球性问题,维生素B12的使用已经从治疗转变为预防,其强化食品的生产已成为一种趋势。但是有关维生素B12鸡蛋营养成分的研究、维生素B12在蛋鸡体内的吸收转运以及影响鸡蛋营养成分变化的分子调控机制研究未见报道。因此,本试验以京红蛋鸡为研究对象,通过短期和全产蛋期饲养试验,借助微生物组、转录组和代谢组技术,系统研究维生素B12对鸡蛋营养成分的调控机制,为维生素B12在蛋鸡生产中的应用提供理论依据和参考。1维生素B12对蛋鸡生产性能及鸡蛋营养成分的影响试验选用30周龄京红蛋鸡756只,随机分为7个组,每组6个重复,每个重复18只,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加25、50、100、400、800、1200μg/kg的维生素B12,预试期2周,试验期6周。结果如下:1.1日粮中添加不同水平的维生素B12对产蛋高峰期蛋鸡产蛋性能无显著性影响（P＞0.05）;添加量等于或高于400μg/kg组显著提高蛋壳比率（P＜0.05）;50、100、400μg/kg组蛋壳厚度显著高于低剂量组（P＜0.05）。1.2与对照组相比,维生素B12添加量等于或高于100μg/kg组的血清全息钴胺素含量显著性增加（P＜0.05）,同型半胱氨酸含量显著性降低（P＜0.05）,100μg/kg组血清转钴胺素蛋白含量最高;100、400μg/kg组肝脏转钴胺素蛋白含量较高（P＜0.05）,甘油三酯的含量在100μg/kg组最低（P＜0.05）,肝脏胆固醇含量随着维生素B12添加水平的升高显著降低（P＜0.05）;等于或高于100μg/kg组肝脏、血清和蛋黄中的维生素B12不再显著升高（P＜0.05）,100μg/kg组蛋黄中维生素B12转化率最高。1.3维生素B 12对鸡蛋常规成分影响不显著。试验组显著提高蛋黄中总脂肪酸含量、单不饱和脂肪酸含量和多不饱和脂肪酸含量（P＜0.05）,日粮维生素B12添加提高了蛋清和蛋黄的氨基酸比值评分。2维生素B12对鸡蛋营养成分的调控机制研究采用实时荧光定量和组学技术对对照组、25、100、400μg/kg组的不同肠道、肝脏、肾脏和卵泡,以及盲肠食糜进行研究。结果如下:2.1试验组回肠和盲肠受体蛋白AMN和CUBN、回肠ATP结合盒亚家族D成员4（ATP binding cassette subfamily D member 4,ABCD4）和溶酶体膜蛋白（lysosomal membrane protein,LYZ）、十二指肠ATP结合盒蛋白C亚群成员（ATP binding cassette subfamily C member,ABCC1）和ABCC6、回肠ABCC2、ABCC3、ABCC6、盲肠ABCC2、ABCC6、十二指肠和回肠钴胺素转运蛋白受体CD320（cluster of differentiation 320）、肾脏低密度脂蛋白受体相关蛋白（low density lipoprotein receptor-related protein 2,LRP2）的m RNA表达量均显著性上调（P＜0.05）。2.2试验组蛋鸡盲肠菌群多样性无调节作用,但改变了菌群结构。试验组蛋鸡盲肠中粪杆菌、帕拉普氏菌属、Blvii28、透明球菌属、Succinatimonas、丁酸球菌、乳杆菌属的相对丰度显著提高,而不动杆菌、Bilophila相对丰度显著降低（P＜0.05）。2.3肝脏中25、100、400μg/kg组各筛选出118、517、1089个差异基因和11、24、46个差异显著代谢产物。100μg/kg组差异基因显著富集KEGG通路中只有1条即细胞周期通路;400μg/kg组酪氨酸代谢途径、苯丙氨酸代谢途径、甘油磷脂代谢途径、糖的合成与分解途径、叶酸一碳代谢途径、视黄醇的新陈代谢途径和谷胱甘肽代谢均显著改变。25μg/kg组差异代谢物显著富集的KEGG通路为维生素B6代谢;100或400μg/kg组显著影响的KEGG通路为嘧啶代谢、嘌呤代谢、维生素B6代谢、甘油磷脂代谢、鞘脂类代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢等。3全产蛋期维生素B12对蛋鸡生产性能及健康状况的影响选取两栋存栏量各1.6万的产蛋鸡开展全产蛋期饲养试验,从21周龄起,对照组和试验组分别在基础日粮中添加25和100μg/kg的维生素B12,饲喂至70周龄。结果发现:试验组提高了蛋鸡产蛋率、血液红细胞、血红蛋白数量、红细胞积压值、白蛋白,糖化血清蛋白、SOD值（P＜0.05）,表明100μg/kg的维生素B12可以改善造血功能,增强蛋鸡抗氧化作用。综上所述,添加适宜的维生素B12可提高鸡蛋的营养价值,增加机体对维生素B12的吸收转运,促进盲肠有益菌生长,抑制有害菌生长,改变肝脏辅酶和维生素代谢、脂肪代谢、核苷酸代谢、氨基酸代谢和糖代谢的相关代谢途径,对蛋鸡健康未产生不良影响,以添加100μg/kg维生素B12为宜。