磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)是在众多被激活信号通路中起到枢纽作用的关键蛋白分子。PI3K不但参与调节早期A型流感病毒进入细胞的过程,而且它的激活还将导致感染后期细胞凋亡被抑制,后者功能的实现则依赖于流感病毒非结构蛋白NS1的表达。已被证实,PI3K调节亚基P85β与NS1蛋白的直接相互作用能导致PI3K的激活,参与次相互作用的位点是NS1蛋白的效应区以及P85β蛋白的iSH2和SH3区域。但是,NS1结合P85β蛋白导致PI3K被激活的具体机制尚不清楚,因此,如果可以得到NS1与P85β蛋白的复合物晶体结构,从而在三维空间结构上定位出蛋白间相互作用的关键氨基酸,并解释这种相互作用所导致的PI3K激活机制是一种潜在的行之有效的方法。在本文的实验中,我们克隆并表达H5N1株NS1效应区蛋白以及P85βiSH2和SH3区域的蛋白,重复验证这些区域的相互作用,结果表明只有P85β的iSH2区域跟NS1效应区存在直接的相互作用,而P85β的SH3区域并不与NS1效应区蛋白相结合。在证明这种相互作用没有亚型的特异性后,我们用各种生化方法纯化出NS1和P85β蛋白及其蛋白复合物,并用坐滴结晶的方法筛选并优化结晶条件,优化结晶条件的工作还在继续进行中。