【摘 要】
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通过鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)繁殖鲤春病毒(SVCV)欧洲株，经差速离心法和蔗糖密度梯度离心法提纯该病毒，免疫Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经建立的间接ELISA法筛选，
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通过鲤鱼上皮瘤细胞(EPC)繁殖鲤春病毒(SVCV)欧洲株，经差速离心法和蔗糖密度梯度离心法提纯该病毒，免疫Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经建立的间接ELISA法筛选，有限稀释法3次克隆后获得了1株能稳定分泌SVCV单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2E9)。
经鉴定，2E9株单抗的亚类为IgG2b，轻链为κ链。上清及腹水的ELISA效价分别达到1：104、1：106。免疫印迹试验表明，2E9株单抗可与SVCV欧洲株约为47kD的蛋白结合。
以制备的2E9株单抗为材料，利用细胞滴片技术，建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法，并对SVCV欧洲株感染的EPC进行动态间接IFA检测，分别取感染后12、24、48、60、72h细胞进行检测，结果表明在感染后36h荧光效果最佳。
通过EPC细胞感染试验和荧光RT-PCR检测方法对SVCV亚洲株进行初步鉴定，结果为阳性。采用已建立的间接IFA试验对感染SVCV亚洲株的EPC细胞进行检测，结果可见到明显的蓝绿色荧光。
SVCV特异性单克隆抗研制和初步应用，为建立OIE推荐的SVCV早期单克隆抗体诊断方法(间接免疫荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验)奠定了基础。
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