大黄鱼（Larimichthys crocea）是中国养殖产量最大的海水养殖鱼类之一，在渔业经济中占有重要地位。随着多年养殖的发展，产业中突出存在大黄鱼个体性早熟、高性腺指数、人工催产排卵锁闭等问题，控制大黄鱼性腺发育成为产业中急需解决的实际问题。因此本文研究大黄鱼繁殖全周期中性腺发育及HPG调控特性，采用组织学、激素放射免疫测定和分子生物学方法，首次克隆了得到了大黄鱼GnRH-Ⅰ、GnRH-Ⅱ、GnRH-Ⅲ、LHR-A、LHR-B和Vasa基因全长cDNA，分析了上述基因的时空表达，并结合性腺发育、血清T、E2、P、FSH和LH含量，综合分析大黄鱼性腺发育过程中的HPG生殖轴的调控变化。
　　1.人工养殖大黄鱼性腺发育变化及激素水平周年变化
　　人工养殖大黄鱼雌性个体性腺成熟经历Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ、Ⅵ期和重复发育Ⅱ期；雄性个体性腺成熟经历Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ、Ⅵ期和重复发育Ⅲ期。大黄鱼在人工养殖条件下一年有两个产卵期，但以春季为主，繁殖高峰为6月及10月。精巢发育早于卵巢，且成熟期维持时间较卵巢更久。大黄鱼GSI随性腺发育逐渐升高，在繁殖高峰的6月达到最高，产卵后显著下降，HSI在繁殖高峰前1个月达到最高，指示其生殖细胞营养积累高峰。采用125I放射免疫法测定大黄鱼血浆E2、T、P、FSH和LH含量，结果显示激素含量在性腺不同发育阶段存在显著差异，但不同激素变化规律不同。雌鱼中表明FSH和E2与卵巢早期发育、卵黄积累密切相关；T、P和LH三者对大黄鱼卵子最终成熟排放具有作用。雄鱼中T对精细胞的生长发育及维持有直接作用；E2在退化吸收期显著高含量与精巢退化降低T的需求有关；P与激发精细胞成熟相关。
　　2.大黄鱼3种GnRH全长cDNA克隆及表达分析
　　利用RACE技术克隆获得大黄鱼3种GnRH全长cDNA序列。经同源比对分析，3个GnRH基因与其它鱼类GnRH依物种亲缘关系呈同源性降低趋势。组织表达分析显示，3种GnRH基因均在脑、垂体、性腺中特异表达，其它组织不表达。对GnRHs基因在性腺中进行时间表达分析，结果显示：养殖条件下大黄鱼不论脑和性腺中，GnRHs均在成熟期前高表达，成熟期时表达量下调；但雌鱼和雄鱼高表达基因不同，在脑中雄鱼为GnRH-Ⅱ，雌鱼为GnRH1-Ⅰ和Ⅲ，性腺中雌鱼为GnRH-Ⅰ、雄鱼为GnRH-Ⅲ，推测大黄鱼GnRH调控存在性别差异。
　　3.大黄鱼促黄体激素受体克隆及表达分析
　　利用RACE技术首次在大黄鱼种克隆获得2种LHR全长cDNA序列。经同源比对分析，2个LHR基因同源率仅有53.96%；通过构建系统进化树，2个LHR基因分属两大硬骨鱼类分支分属脊椎动物LHR两个大类。组织表达分析显示，2中LHR均在性腺中特异高表达，其它组织少量或不表达。对2种LHR基因在性腺中进行时间表达分析，结果显示：精巢LHR-A表达量在前三个时期保持同一水平，当精巢发育处于成熟期晚期时升至最高。精巢LHR-B表达量在Ⅳ期时显著下降，之后于V期又显著上升，最后于VI期达到峰值。卵巢LHR-A表达量在Ⅱ期处于较高水平，随后于Ⅲ期出现显著下降，之后于Ⅳ显著上升，并在之后的VE及VL期保持在同一水平，最后于Ⅳ期显著下降至最低点。卵巢LHR-B表达模式与卵巢LHR-A表达模式类似，在Ⅲ出现显著性下降，之后于Ⅳ期保持同一水平，但在VE期出现显著上升，且与成熟期保持高水平表达，最后于VI期显著下降。表明两种类型的LHR，与LH结合后共同促进雌雄鱼的排卵排精。
　　4.大黄鱼Vasa基因克隆及表达分析
　　利用RACE技术克隆获得1种Vasa基因全长cDNA序列。经同源对比分析，其同源性与同为石首鱼科黄姑鱼最为接近。组织表达分析显示，Vasa基因在性腺中特异高表达，其它组织微量或不表达。对性腺中Vasa基因进行时间表达分析，结果显示Vasa基因在精巢发育前期逐渐升高，并在Ⅳ期精细胞期达到最高，成熟期与退化吸收期则显著降低；卵巢中同样在发育前期逐渐升高，并在初级卵黄期达到最高，其后降低并维持至退化吸收期。表明Vasa基因主要在生殖细胞减数分裂前期高表达。
　　总结：通过本研究表明大黄鱼生殖细胞成熟不同步，雄鱼性腺成熟早于雌鱼，适应多次产卵群体繁殖需要。大黄鱼性腺发育符合HPG调控模式，GnRH为大黄鱼性腺发育主要的调控基因。通过GnRH刺激脑垂体完成GtH合成释放，血液中GtH含量与性腺发育同步升高，LHR也同步表达并作用性腺成熟过程；性类固醇激素E2在卵巢成熟前期及卵黄沉积中发挥主要促进作用，T不仅是精巢发育的主效激素，其高水平表达也有助于卵子的最终成熟，P刺激生殖细胞最终成熟。Vasa对生殖细胞前期分化具有重要作用。