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目的 HOXA10是胚胎黏附的重要调控分子,其表达降低将导致胚胎种植失败,已知反复种植失败患者子宫内膜组织中Nur77和HOXA10的表达均降低。本研究旨在探究Nur77是否通过转录调节HOXA10表达参与胚胎黏附的调控。方法 1、通过荧光素酶双报告基因、染色质免疫共沉淀以及链亲和素-生物素偶联DNA沉淀反应实验明确Nur77转录调控HOXA10的机制;2、采用腺病毒Ad-Flag-Nur77和Ad-siNur77介导Nur77的过表达和抑制表达,并通过Western Blot实验检测Nur77对人子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞中HOXA10表达的影响;3、利用Nur77激动剂6-MP和JAR球黏附实验(人胎盘绒毛癌细胞JAR细胞球黏附于Ishikawa细胞)明确HOXA10介导Nur77对胚胎黏附的作用。结果 荧光素酶双报告基因、染色质免疫共沉淀和链亲和素-生物素偶联DNA沉淀反应实验结果证实Nur77直接结合于HOXA10启动子区的NBRE反应元件AAAGGTCA(-3075/-3067),并促进 Ishikawa 细胞中 HOXA10 的转录。腺病毒Ad-Flag-Nur77介导Ishikawa细胞中Nur77高表达以浓度梯度依赖的方式促进HOXA10蛋白的表达,并促进JAR细胞球黏附于Ishikawa细胞上,黏附率为57±4.2%(vs34±5.5%,p<0.05,vsAd-LacZ);采用 Ad-siNur77 腺病毒干扰 Ishikawa细胞中内源性Nur77表达后,有效地抑制HOXA10蛋白表达,且JAR细胞球与Ishikawa细胞间的黏附作用明显降低,黏附率为24.3±3.7%(vs 38±3.0%,p<0.05,vs Ad-CTL)。当利用CRISPR-Cas9技术制备的腺病毒基因抑制Ishikawa细胞中内源性HOXA10表达后,Nur77促进JAR球的黏附作用则被显著削弱,同时Nur77激动剂6-MP显著促进JAR细胞球黏附于Ishikawa细胞上,黏附率为62.3±1.8%(vs 38.3±1.40%,p<0.0001,vs Ad-CTL)。结论 本研究首次发现孤儿核受体Nur77通过转录调控HOXA10的表达促进胚胎黏附,提示孤儿核受体Nur77及其激动剂6-MP有望为增加反复种植失败患者的胚胎种植率提供新的诊疗依据。