近年来,随着畜牧业的快速发展,青贮饲料己被世界各国所重视,特别是畜牧业发达国家已将其列为发展畜牧业的重要手段和措施加以推广应用和研究。为了能充分开发利用秸秆资源,需对农作物秸秆进行科学处理调制。通过乳酸菌发酵产生酸性环境抑制和杀死有害微生物,改善青贮饲料的发酵品质、营养价值以及提高畜禽机体抵抗力等方面的研究越来越被关注。本实验从青贮饲料等样品中大量分离乳酸菌菌株。试验确定乳酸菌的最佳培养条件为MRS培养基37℃厌氧培养。经初筛后选出14株乳酸杆菌,应用乳酸纸层析的方法确定了其中9株乳酸菌株为乳酸菌的同型发酵菌株。生化试验和酯酶电泳图谱鉴定结果表明:X1、M16、N3三株乳酸菌为短乳杆菌;S9、S7、LM1、LM3四株乳酸菌为植物乳杆菌;N5、C15两株为发酵乳杆菌;而Y17一株不能鉴定。进一步对9株乳酸菌进行了生长性能、产酸量等生物学特性测定。将乳酸菌制备为3×106 CFU/ml的菌悬液,按6%接种量接种于MRS液体培养基中培养,每2h取一次样进行菌体密度值、pH值和产酸量的测定。菌体密度值检测结果显示:乳酸菌进入对数生长期的时间段为8~18h,在24h以后逐渐趋于平缓到达生长稳定时期。pH值和产酸量的测定结果显示:乳酸菌在培养8h以后pH值下降较快。乳酸菌产酸量高的时间段为14~36h。经过对综合研究分析得出LM3、S9、N3这三株乳酸菌的生长性能较为优越,适合作为筛选发酵剂的侯选菌种。建立了牛津杯法检测乳酸菌细菌素体外抑菌试验方法。用筛选出的9株乳酸杆菌的培养物10,000rpm/min离心的上清液,经90℃5min加热处理后对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、气单胞菌、蜡样芽胞杆菌进行了体外抑菌试验。试验结果显示:9株乳酸菌对测试菌均有一定的抑菌效果,其中X1、C15、LM3三株乳酸菌的抑菌效果最为明显。选用X1、C15两株乳酸菌培养物的上清液,经硫酸铵盐析、离心、透析等,进行细菌素的提取。对细菌素提取液用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳初步判定有细菌素的存在。选用生长性能较好的LM3菌株,以3%和6%不同的接种量接种于新鲜的玉米秸杆中进行发酵试验,同时设对照组。每20天取样一次,用平板微量表面滴种法检测各组发酵料中的乳酸菌的活菌数。从20天到100天的检测结果表明,添加乳酸菌菌液的青贮料中乳酸菌活菌数呈上升变化,而对照组未添加乳酸菌菌液的青贮料中乳酸菌活菌数变化不大,6%的乳酸菌添加量优于3%的乳酸菌添加量。