本文由两部分构成，一是利用反转录PCR(RT-PCR)和套式PCR(nPCR)技术克隆出3株广西近期(1999—2000年)猪瘟流行野毒株的E2基因，并对其核苷酸序列及氨基酸序列的同源性进行比较及分析，绘制了系统关系发生树，以期了解近期猪瘟流行野毒主要保护性抗原基因E2的变异情况，为猪瘟的防制提供分子流行病学方面的资料。二是利用大肠杆菌原核表达系统，通过基因重组技术高效表达猪瘟病毒E2基因主要抗原区蛋白，为研制以重组蛋白为检测抗原的猪瘟诊断方法打下基础。主要实验和结果如下： (1)采用RT-PCR和nPCR扩增出3株广西近期(1999-2000年)猪瘟流行野毒的E2基因，将其分别克隆于PMD-18T载体并进行核苷酸序列测定，根据C-株及Brescia和Alfort株确定起始氨基酸三联体的正确位置后进行氨基酸序列推导，同时进行了同源性比较及E2糖蛋白(gp55)结构的分析，绘制了系统关系发生树。结果表明，所测3株CSFVE2基因的长度均为1170bp，编码的氨基酸序列均包括完整信号肽序列和部分跨膜序列，共由384个氨基酸组成。3株流行毒的E2基因核苷酸序列同源性为90.10％～98.54％，相应的氨基酸序列同源性为89.59％～97.92％。这3株流行毒与C-株兔脾组织毒(疫苗毒)E2基因的核苷酸序列同源性为82.87％～83.99％，相应的氨基酸序列同源性为86.98％～90.10％，表明近期猪瘟流行毒与C-株疫苗毒的gp55蛋白之间存在一定的差异。 (2)利用RT-PCR和nPCR技术扩增出当前猪瘟流行野毒株(广西玉林株，GXYL)与中国猪瘟兔化弱毒(C-株)兔脾组织毒E2基因的主要抗原区，将其克隆到表达载体pPROEX-HTb中，获得重组质粒pPROEX-GXYL和pPROEX-C，经PCR、酶切和序列分析鉴定表明，插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明，重组质粒pPROEX-GXYL和pPROEX-C经转化、诱导的受体菌均能表达E2基因主要抗原区蛋白，Western blot检测表明，诱导表达的抗原蛋白能与猪瘟阳性血清发生特异性反应。广西玉林株表达的蛋白含量占菌体蛋白的35％，C-株表达的蛋白含量占菌体蛋白的38％。