研究背景胆管癌(cholangiocarcinoma, CC)为起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤。近年来的流行病学研究显示在世界各地,特别是在西方发达国家及亚洲国家胆管癌的发病率和死亡率逐年上升。胆管癌的病因复杂,是一个由多因素构成参与的过程,并且病因具有地域差异性。在西方国家,原发性硬化性胆管炎是胆管癌最常见的发病原因,而在亚洲国家,其主要病因为肝吸虫病和胆管炎症。此外,病毒性肝炎、糖尿病、吸烟、饮酒、基因多态性、肥胖等也被报道与胆管癌发病相关。胆管癌起病隐匿,早期症状不明显,初期诊断困难,病情进展快,其治疗方式除早期外科手术外,缺乏其他有效的治疗手段,放疗及化疗远期疗效不佳,术后容易复发和转移,总体5年生存率低,预后极差。因此,寻找新的诊疗方法,提高早期诊断率以延长患者生存期尤为重要。随着物质生活水平的提高,肥胖人群在全球范围内增长明显,已经成为严重危害人们生命健康的的公共问题。肥胖可以导致多种疾病的发生,包括糖尿病、高血压、冠心病、代谢综合征等等。肥胖被报道增加多系统肿瘤的发病风险,包括乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、前列腺癌、肝癌、淋巴瘤等。肥胖导致肿瘤发生的生物分子机制可能与胰岛素抵抗、瘦素、胰岛素样生长因子以及与肥胖相关的炎性细胞因子、核因子等有关。目前已知参与肥胖发生的基因家族包括肥胖相关基因、瘦素、脂联素、抵抗素等基因。其中肥胖相关基因(fat mass and obesity associated, FTO)与肥胖关系最为密切,FTO基因参与人体脂肪代谢、能量调节、生长发育等过程,与体重指数(body mass index, BMI)也存在一定关联。目前,已有研究证实肥胖相关基因及基因多态性与多种疾病及多个系统肿瘤密切相关,但FTO基因多态性与胆管癌相关性的研究尚未见报道。本课题分为两部分,第一部分采用病例对照研究的方法,病例组选取胆管癌病人,对照组为健康查体人群,对肥胖相关基因(FTO) rs8050136、 rs9939609位点多态性与胆管癌发病的相关性进行研究,分析肥胖相关基因多态性、胆管癌发病风险、BMI之间的关系,并探讨FTO基因多态性和胆管癌疾病分期及病理分化程度的相关性。第二部分检索肥胖与胆管癌发病相关的中文及英文文献,并进行meta分析,探讨肥胖与胆管癌之间的关系。第一部分FTO基因rs8050136、rs9939609多态性与胆管癌的相关性研究肥胖相关基因(FTO)是与肥胖联系最为密切的基因,位于16q12.2染色体上,编码一个2-酮戊二酸(2-OG)的Fe(Ⅱ)依赖性双加氧酶,参与饮食调节、能量平衡、脂肪代谢及转录的调控。FTO蛋白主要在脂肪、胰腺、肝脏、脑组织等与体内能量代谢相关的组织中表达。FTO基因功能丧失会导致发育迟缓,消瘦,代谢率增高和贪食。已有研究报道了FTO基因单核甘酸多态性与肥胖、心血管代谢特征相关疾病(如冠心病、高血压、代谢综合征等)及多系统肿瘤的发病存在相关性,目前尚无FTO基因多态性与胆管癌之间关系的研究,为了研究FTO基因多态性与胆管癌的关系,进行此部分研究,分析FTO基因多态性与胆管癌的发病风险、肿瘤的临床分期和分化的关系,研究胆管癌临床病理特征与FTO基因多态性的关系。目的方法本课题研究FTO基因多态性与胆管癌发病的关系,选取位点为rs8050136、rs9939609。病例组对照组比例为1：1.5,病例组为204例经病理确诊为胆管癌的患者,对照组为306例健康查体者。本研究采取SNP直接测序法测定FTO基因rs8050136、rs9939609基因多态性,并测定了基因型的频数,分析rs8050136、rs9939609等位基因、基因型与胆管癌发病风险的关系；分析不同基因型与胆管癌肿瘤TNM分期、分化及临床特征的关系。结果1.临床资料对比：病例组与对照组比较,体重指数(BMI)、糖尿病史、乙肝病史存在差异,性别、年龄、吸烟史、饮酒史、高血压病史、高脂血症病史对比无差异。进一步分析显示胆管癌发病风险与BMI存在相关性,超重增加胆管癌发病风险。2.FTO基因多态性与BMI的关系：rs8050136基因多态性中AC/AA基因型携带者平均BMI显著高于CC基因型携带者,与CC基因型相比,AC/AA基因型携带者肥胖及超重的发病风险增加；rs9939609AT/AA基因型携带者平均BMI显著高于TT基因型携带者,与TT基因型相比,AT/AA基因型携带者肥胖及超重的发病风险增加。3.FTO基因多态性与胆管癌的关系：rs8050136基因多态性中AC基因型与胆管癌发病风险显著相关(单因素：OR=1.642,95%CI=1.058～2.55, P=0.027;调整了混杂因素后进行多因素回归分析：AOR= 1.697,95% CI=1.067～2.699, P=0.025); AC+AA基因型增加胆管癌患病风险(单因素：OR=1.617,95%CI= 1.063～2.462, P=0.025;多因素：AOR=1.687,95% CI=1.082～2.631,P=0.021);等位基因A与胆管癌发病风险显著相关(OR=1.507,95% CI=1.038～2.189, P=0.031),而调整了BMI后发现AC、AC+AA基因型在超重人群中增加胆管癌发病风险(AC：AOR=2.102,95% CI=1.007-4.387, P=0.048; AC+AA:AOR= 2.163,95%C 1=1.068～4.381, P=0.032),在肥胖和正常体重人群中AC、AC+AA基因型并不增加胆管癌发病风险。rs8050136基因多态性与胆管癌分期、分化程度无相关性。rs9939609基因多态性中AT基因型与胆管癌发病风险显著相关(单因素：OR=1.603,95% CI=1.008～2.549, P=0.046:调整了混杂因素后进行多因素回归分析：AOR=1.654,95%CI= 1.018～2.687, P=0.042); AT+AA基因型增加胆管癌患病风险(单因素：OR=1.711,95%CI=1.067～2.643, P=0.016;多因素：AOR-1.776,95%CI=1.125～2.804, P= 0.014);等位基因A增加胆管癌发病风险(OR= 1.712,95%CI= 1.164～2.516, P=0.006);而调整了BMI后发现AT、AT+AA基因型在超重人群中增加胆管癌发病风险(AT:AOR= 3.156,95%CI=1.524～6.537, P=0.002; AT+AA:AOR=3.126,95% CI=1.562～6.256,P=0.001),在肥胖和正常体重人群中AT、AT+AA基因型不增加胆管癌发病风险。rs9939609基因多态性与胆管癌分化、胆管癌分期无相关性。结论1.FTO基因多态性与胆管癌发病风险之间存在相关性。rs8050136位点等位基因A增加胆管癌发病风险,AC基因型、AC+AA基因型与胆管癌发病风险增加有关；rs9939609位点等位基因A增加胆管癌发病风险,AT基因型、AT+AA基因型增加胆管癌发病风险。2.调整BMI后,在超重人群中,rs8050136位点AC基因型AC+AA基因型与胆管癌发病相关；rs9939609位点AT基因型、AT+AA基因型增加胆管癌发病风险,FTO rs8050136、rs9939609导致胆管癌发病与BMI存在关联。第二部分肥胖与胆管癌相关性的meta分析肥胖是全球一种常见的疾病,随着生活方式及饮食习惯的改变,体力活动的减少等原因,肥胖和其相关疾病的发病率不断增加,每年因肥胖及肥胖相关疾病死亡的人数不断增加,在许多国家,肥胖已经成为主要公共卫生问题,我国肥胖超重人群增长迅速,特别是青少年超重肥胖问题严重。流行病学研究提供了强有力的证据表明肥胖及超重可以导致多种疾病的发生,并增加多种类型癌症,包括乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、胃癌等的发病风险。目前已有多个研究探讨肥胖与胆管癌的发病风险是否相关,但研究结果并不完全-致。在不同国家、种族、性别中的研究结果具有差异性。本部分研究通过检索肥胖与胆管癌发病相关性的文献,对这些研究结果进行统计分析。目的方法在本部分研究中通过检索PubMed, Cochrane, EMBASE三个数据库中关于肥胖与胆管癌相关的病例对照和队列研究,进行meta分析,探讨肥胖与胆管癌发病之间的关系。结果1.肥胖与胆管癌发病风险的分析10项研究纳入meta分析,其中包括5个队列和5个病例对照研究。与正常体重人群相比,超重、肥胖、过重增加胆管癌的发病风险,超重(OR：1.30,95%CI：1.13-1.49),肥胖(OR:1.52,95% CI:1.13-1.89),和过重(OR：1.37,95%CI：1.22-1.55),亚组分析显示研究不存在偏倚。2.亚组分析根据研究类型、国家、性别、胆管癌类型进行亚组分析发现,汇总病例对照研究的结果,过重与胆管癌发病风险的OR值为1.36(95% CI:1.09-1.70),队列研究中为1.38(1.21-1.59),肥胖与胆管癌发病风险与之类似。在男性患者中,过重、肥胖、超重与胆管癌发病风险存在相关性,具有统计学意义(分别为总OR:1.42,95% CI:1.23-1.65;总OR:1.89,95% CI:1.29-2.76;总OR:1.33,95% CI:1.13-1.58);但是在女性患者中不存在相关性,(分别为总OR:1.18,95% CI:0.83-1.68;总OR:1.70,95% CI:0.77-3.75;总OR：1.08,95% CI：0.73-1.60)。在亚洲人群中过重与胆管癌发病风险显著相关,OR值为1.46；95% CI：1.21-1.76,在非亚洲人群中,OR:1.31; 95% CI:1.12-1.53,具有统计学意义；在亚洲人群中肥胖与胆管癌发病风险无相关性(OR:1.64,95% CI:0.73-3.69),在非亚洲人群中肥胖与胆管癌发病存在相关性(OR:1.53,95% CI:1.22-1.91);在亚洲人群中,超重与胆管癌发病风险存在相关性(OR:1.30,95% CI:1.11-1.52),在非亚洲人群中超重与胆管癌发病风险无关(OR:1.27,95% CI:0.86-1.87)。过重、肥胖与肝外胆管癌发病风险显著相关(过重OR:1.31; 95% CI,1.09-1.58;肥胖OR：1.41; 95% CI,1.09-1.84),而在肝内胆管癌人群中,肥胖与肝内胆管癌发病风险无关。结论Meta分析表明胆管癌发病风险与BMI存在相关性,肥胖、超重可增加胆管癌的发病风险。