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随着工农业技术的不断发展和生活水平的不断提高,大量的生活生产废弃物排放进入水环境中,导致水生态环境的日益恶化,并成为当今世界普遍关注的焦点问题。三氯生(Triclosan,TCS)作为一种高效广谱抗菌剂被广泛用于洗手液、清洁剂、除臭剂、牙膏、厨房用具等个人护理用品及家居用品中。该化学物质会通过多种途径进入到地表水、土壤、地下水等各种环境介质中。目前,在我国及世界其它一些国家和地区的河口、河流和海水中,TCS均被广泛检出。此外,由于锌矿开采、冶炼加工、机械制造以及镀锌、有机物合成等工业的快速发展,并伴随工业废水的大量排放,水域的重金属锌污染亦日趋严重。水体中各类化学污染物的存在会对水域非靶标生物的生存繁殖、生态系统的结构等造成威胁。研究表明,TCS可在多种水生生物如贻贝、鱼类、两栖动物体内富集;亚致死浓度的TCS水体暴露可导致两栖类幼体存活率下降、体重减轻,并可干扰甲状腺激素调控下的变态进程等。水体中过量Zn2+可对水生生物造成急性毒性效应,此外,也可对鱼类的呼吸强度、孵化率等产生不利影响。然而,目前有关TCS污染胁迫对两栖动物胚胎发育、蝌蚪变态后个体大小和骨骼发育的影响以及Zn2+污染胁迫对两栖动物蝌蚪生长发育的慢性毒理效应均未见详细报道。本研究旨在以中华大蟾蜍(Bufo gargarizans)为研究对象,研究TCS慢性暴露对其胚胎及蝌蚪生长发育的影响,及Zn2+慢性暴露对中华大蟾蜍蝌蚪生长发育的慢性毒理效应。从而为TCS和Zn2+污染的生态风险评价提供科学依据。本论文的具体研究内容及结果如下:1.对中华大蟾蜍G3期胚胎进行0、10、30、60和150μg·L-1TCS的慢性水体暴露至胚胎发育阶段结束。分析了TCS对中华大蟾蜍胚胎死亡数、畸形率、全长、体重、发育分期的影响,并通过原位杂交和半定量PCR分析了TCS对脱碘酶D2和D3表达空间分布和表达水平的影响。结果显示,30-150μg·L-1TCS可显著抑制中华大蟾蜍胚胎的全长和体重和发育分期;TCS暴露导致胚胎畸形率增加,畸形特征主要表现为增生、腹部水肿和尾部弯曲。此外,半定量PCR结果表明60μg·L-1和150μg·L-1TCS处理导致中华大蟾蜍胚胎D2基因表达下调,然而原位杂交结果显示该基因的表达空间分布并未受到影响。2.对中华大蟾蜍G3期胚胎进行0、10、30、60和150μg·L-1 TCS的慢性水体暴露直至蝌蚪发育至变态完成期(G46期)。分别于暴露40 d和55 d后取样测定蝌蚪全长、体长、体重和发育分期各指标;此外,分析了TCS对变态完成期(G46)蝌蚪体长、体重、后肢长和骨骼发育的影响。结果表明:暴露40 d时,150μg·L-1 TCS促进了蝌蚪的生长发育,表现为蝌蚪全长、体重和发育分期的增大,而持续暴露55d后,仅150μg·L-1处理组蝌蚪的体长较对照组相比显著增加,其余各指标均未受到影响;60、150μg·L-1 TCS暴露导致G46期中华大蟾蜍蝌蚪的形态指标(全长、体长)和骨化程度均受到显著抑制。3.对中华大蟾蜍G26期蝌蚪进行了0、10、50、100和500μg·L-1 Zn2+的慢性水体暴露直至蝌蚪发育至变态高峰期(G42期)。分别于暴露15 d和30 d后取样测定蝌蚪全长、体长、体重和发育分期各指标;此外,分析了Zn2+慢性水体暴露对变态率、变态高峰期(G42)蝌蚪的全长、体长、体重、后肢长和骨骼发育的影响。结果表明:暴露15 d时,各浓度Zn2+对中华大蟾蜍蝌蚪的生长发育均未造成显著影响,而持续暴露30 d后,500μg·L-1 Zn2+处理组蝌蚪的生长发育受到显著抑制;各浓度Zn2+慢性暴露均导致中华大蟾蜍蝌蚪变态率的下降,其中500μg·L-1 Zn2+处理组的变态率最低;500μg·L-1 Zn2+慢性暴露导致G42期中华大蟾蜍蝌蚪的形态指标(全长、体长、后肢长)和骨化程度均受到显著抑制。