【摘 要】
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背景:先天性膈疝（congenital diaphragmatic hernia,CDH）是一种由胎儿膈肌生长不完整和肺异常发育引起的先天胚胎畸形疾病。发病率为万分之2.5-5.7,总死亡率可达45%-75%。随着CDH研究的不断进步,新生儿产后支持治疗和膈肌修复手术相对成熟,但对重症CDH患儿的死亡率的降低仍然进展不大,其主要原因是肺发育不良和持续性肺动脉高压难以纠正。目的:探讨在CDH动物模型
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背景:先天性膈疝（congenital diaphragmatic hernia,CDH）是一种由胎儿膈肌生长不完整和肺异常发育引起的先天胚胎畸形疾病。发病率为万分之2.5-5.7,总死亡率可达45%-75%。随着CDH研究的不断进步,新生儿产后支持治疗和膈肌修复手术相对成熟,但对重症CDH患儿的死亡率的降低仍然进展不大,其主要原因是肺发育不良和持续性肺动脉高压难以纠正。目的:探讨在CDH动物模型中,炎症诱导ASK1/MAPK凋亡通路改变与胎肺发育异常的关系。方法:SPF级SD大鼠在怀孕9.5天时随机分组,通过nitrofen和西地那非干预后分为空白对照组（Control组）、膈疝组（CDH组）和CDH+西地那非干预组（CDH+S组）。采用RT-q PCR技术检测胎儿肺ASK1/MARK通路的m RNA表达量。采用WB检测p-ASK1/JNK/P38α蛋白表达。HE分析胎肺切片,IHC定位ASK1/JNK/P38α的蛋白表达位置。结果:成功获得Control组50只活胎,CDH组84只活胎,CDH+S组37只活胎。HE染色,与正常组相比,CDH组的肺明显发育不良及血管重构,CDH+S组明显改善。免疫组化显示,ASK1、P38α、JNK在各个组中均有表达,定位在肺叶边缘、气管、气管软骨、周围结缔组织、发育不良全肺叶及部分血管。RT-q PCR显示,ASK1与上游TGFBR2、DAXX和下游P38α、JNK均呈正相关（r=0.6323、p＜0.0001;r=0.7754、p＜0.0001;0.8144、p＜0.0001和r=0.2837、p=0.0459）,TGFBR2-DAXX-ASK1-P38α/JNK的变化具有相关性。DAXX中,CDH组和CDH+S组均较Control组升高（Control组3.92±0.79/CDH组5.01±1.63/CDH+S组4.97±1.07;p＜0.05）;ASK1中,CDH组较Control组显著升高（Control组4.51±1.04/CDH组6.8±3.16/CDH+S组5.38±2.05;p＜0.05）;MKK3中,CDH+S组较Control组和CDH组升高（Control组2.49±0.44/CDH组2.42±0.51/CDH+S组2.94±0.80;p＜0.05）;MKK4中,CDH+S组较Control组和CDH组显著升高（Control组11.01±2.72/CDH组13.11±4.14/CDH+S组16.27±4.35;p＜0.05）;WB:相对于Control组,CDH组的JNK蛋白表达明显增加（Control组/CDH组/CDH+S组,1.00±0.50/3.32±1.40/2.28±0.73;p＜0.05）。结论:在nitrofen诱导的动物模型,胎肺的TGFBR2-DAXX-ASK1-JNK/P38α通路的上调可能与肺发育不良及肺动脉高压有关。
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