二乙基亚硝胺诱导大鼠原位肝癌模型的建立及TACE应用研究

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目的:建立二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的原位大鼠肝癌模型,评价该动物肝癌模型的病理学特性及其在肝癌经动脉化疗栓塞(transarterial chemoembolization,TACE)中的应用价值。材料和方法:本研究采用浓度为0.01%的DEN口服诱导的方法建立大鼠原位肝癌模型60只(雄性,平均体重160-180g),将其分为肿瘤模型组(n=40)和TACE应用组(n=20只)。对肿瘤模型组处理如下,从DEN诱导后第6周开始,每周对实验动物规律进行肝脏MRI检查,观察肿瘤形成;当磁共振显示肝脏形成0.2cm左右肿瘤结节时,停止DEN诱导,随机处死5只动物,对其肿瘤及肝脏取样进行肉眼观、HE及Masson检查,观察肿瘤及邻近肝组织病理变化;当磁共振显示肝脏肿瘤结节达0.5cm时,再随机处死5只动物,观察肿瘤及邻近肝组织病理变化;待磁共振确定肝脏成瘤后,继续每周行肝脏磁共振检查及每2周肺部CT检查,观察肿瘤生长、转移情况,并记录动物生存时间。在TACE应用组中,当经磁共振显示肝肿瘤病灶直径达到0.5cm时,采用开腹经胃十二指肠动脉逆行插管的方法进行经导管动脉造影和TACE治疗操作,观察并记录大鼠肝癌模型的血管造影改变、TACE操作的成功率和动物死亡情况;TACE术后3天、7天分别各处死一半实验动物,进行病理大体肉眼观及HE染色,检测肿瘤坏死。结果:在所有SD大鼠中,均在严重肝炎肝硬化背景下诱导出原位HCC。肿瘤模型组,磁共振显示肿瘤结节直径达0.2cm时,中位诱导周数为8周(7,10);标本大体肉眼观可见肝脏体积增大,肿瘤呈灰白色微小结节;HE检查显示肝细胞水肿,炎性细胞浸润,部分假小叶形成,肿瘤结节证实为肝细胞癌;Masson检查可见部分深染的胶原纤维包绕假小叶。结节直径达0.5cm时,中位诱导时间为11周(10,12);标本大体观体积缩小,表面大量结节出现;HE检查可见典型假小叶形成,正常纤维间隔被破坏;Masson检查可见胶原纤维明显增多,肝脏纤维化进一步加重。部分动物观测到肝外器官及淋巴结转移。荷瘤大鼠中位生存时间为诱导后13周(8,20)。TACE应用组,DSA证实该肝癌模型为富血供肿瘤;本组诱导期间4只大鼠死亡,TACE操作成功率为68.8%(11/16),TACE操作相关死亡率为18.8%(3/16);HE检查结果显示术后3天坏死率为48.16%±2.65,术后7天坏死率为50.36%±2.92。结论:DEN诱导的大鼠原位肝癌模型较好的模仿了人类HCC的肿瘤特征及肝炎背景,且可通过经胃十二指肠动脉逆行插管方式进行TACE操作,是一种理想的介入经导管动脉内治疗动物模型。
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