HEATR-1在胃癌中的表达及其相关性研究

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目的:运用两株胃癌细胞BGC-823和AGS检测HEATR-1(HEATR repeat containing-1)基因的表达,当其在胃癌细胞中高表达后,在胃癌组织和正常胃组织中检测HEATR-1的表达情况;免疫组织化学方法观察正常胃黏膜和胃癌组织石蜡切片中HEATR-1蛋白的表达。方法:根据在基因库中检索HEATR-1的m RNA核苷酸序列,设计、合成引物序列,胃癌细胞株经培养后接种于六孔培养板中,行Q-PCR检测胃癌细胞株BGC-823和AGS内源性目的基因表达,确认其在胃癌细胞中高表达后,在术前明确诊断并手术的胃癌患者的胃癌组织行Q-PCR检测HEATR-1的m RNA表达水平与正常组织之间表达,并对胃癌术后的石蜡切片行免疫组化染色,评估HEATR-1蛋白在石蜡切片的表达,并运用免疫组化评分方法,探讨HEATR-1阳性表达与胃癌组织学类型的关系。结果:胃癌细胞株内源性基因检测,HEATR1基因高表达于两株胃癌细胞AGS和BGC-823(AGSΔCt均值=7.10,BGC-823ΔCt均值=6.59,m RNA相对表达量分别为7.10±0.111、6.59±0.123);行20例胃癌患者的胃癌组织和阴性切缘行Q-PCR检测HEATR-1的m RNA表达量,其中12例患者高表达,8例低表达,两组间m RNA相对含量行配对t检验,P<0.05,差异有统计学意义;选取胃癌和正常胃黏膜石蜡切片各12例,胃癌组织石蜡切片HEATR1蛋白明显高表达于正常胃组织,并高表达于细胞膜和细胞质,用免疫组化评分方法,比较正常组和胃癌组之间免疫组化染色的差异,胃癌组评分(4.84±1.642),对照组评分(1.92±0.900),经非配对t检验,P=0.032,P<0.05,两组间差异有统计学意义,以上结果,表明HEATR1高表达可能与胃癌的发生发展有关。结论:HEATR-1基因在胃癌细胞株和胃癌组织中高表达,其可能是胃癌发生的一个致病基因,并有望成为后期胃癌分子免疫治疗的靶点。
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