脓毒症大鼠甲功、D2活性变化及血必净干预研究

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目的:观察脓毒症大鼠IL-6、TNF-α、甲状腺激素水平及下丘脑和脂肪组织2型脱碘酶(D2)相对表达量的变化,并探讨血必净注射液对其干预影响。方法:100只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组和血必净组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备大鼠脓毒症模型。血必净组于CLP术后1h内即刻给予静脉注射血必净注射液5ml/kg,其余各组大鼠注射等体积生理盐水,12h后再次给予等量血必净静脉注射。观察术后大鼠精神、活动状态及腹腔内情况以评估模型。各组分别于给药后12h、24h腹主动脉取血,采用放射免疫分析技术(RIA)测定大鼠血清T3、T4及TSH水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清IL-6、TNF-α水平;同时,分别取下丘脑及脂肪组织,Trizol法提取组织总RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)测定以上两种组织的D2mRNA相对表达量。结果:1.与正常组及假手术组大鼠比较,CLP术后16h大鼠明显精神、活动状态差,并可闻及腹腔内恶臭味,肉眼可见肠蠕动减弱、小肠明显水肿、肠壁可见出血点、肠管内有浑浊液体积聚。2.与正常组及假手术组相比,CLP脓毒症大鼠于成模后12h、24h的血清IL-6、 TNF-α水平均显著升高(均P<0.01),给予血必净注射液处干预后均可使二者不同程度下降(与模型组比较,均P<0.01);而且,随着药物作用时间的延长,IL-6、 TNF-α水平的下降更加明显。3.与正常组及假手术组相比,CLP脓毒症大鼠于成模后12h、24h血清T3及TSH水平下降(均P<0.01),给予血必净注射液干预后二者均可得到不同程度的回升(与模型组比较P<0.05或P<0.01),且存在一定的时间依赖性;随着脓毒血症时间的延长,成模后24h血清T4水平才见明显下降(P<0.01),给予血必净注射液处理后24h亦可得到一定程度的回升(与模型组比较P<0.05),而处理12h则未见T4变化。4.与正常组及假手术组相比,CLP脓毒症大鼠于成模后12h、24h下丘脑D2相对表达量升高(均P<0.01),而脂肪组织的D2表达量则下降(均P<0.01),给予血必净干预12h或24h后,前者均可见下降(与模型组比较P<0.01),后者均升高(与模型组比较P<0.01)。结论:CLP脓毒症大鼠血清IL-6、TNF-α水平变化的同时存在甲状腺激素T3、T4、TSH的水平以及下丘脑和脂肪组织D2活性的改变,血必净注射液对此有一定的干预作用,其机制可能是药物改变了炎性细胞因子对D2活性的影响,进而起到调节脓毒症大鼠血清甲状腺激素水平的作用。
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