成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性研究

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目的:了解成年兔心耳组织体外培养扩增心肌细胞的生物学特性,探讨心耳组织作为提供自体心肌细胞组织材料来源的可能性。材料和方法:选新西兰成年兔11只,分别取少量心耳组织,酶解法制成细胞悬液,体外培养。于培养0、 12、 26、 40天进行细胞计数;培养12、 26天测定细胞染色体含量:培养0、 40天时,取部分细胞行免疫组化染色检查,计算心肌细胞百分比;培养26天,电镜检查细胞的超微结构:培养12天时,取部分细胞置-80℃冷冻保存,8周后快速解冻,体外继续培养观察。结果:细胞计数分别为0. 54±0. 06×107、 7. 38±0. 73×107、 58. 00±16. 14×107、 24. 91±11. 86×107;DNA含量测定S期细胞分别为22. 2%、56. 5%;免疫组化染色检查判定心肌细胞所占的比例分别为82±11%、87±18%;电镜下可见心肌细胞肌原纤维的横纹;冷冻的心肌细胞快速解冻后,体外培养可继续生长扩增。结论:成年兔心耳组织来源的心肌细胞,在有限的体外传代培养过程中,数目可扩增,其亚显微结构和成份基本稳定,可作为提供自体细胞的组织材料。
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