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随着人们对天然功能性食品的要求越来越高,在食品及医药行业具有潜在应用前景的天然抗氧化肽越发受到关注。亚麻籽蛋白作为一种优质的蛋白资源,具有很高的研究价值。本论文以脱胶脱脂的亚麻籽粕为原料,提取其中的蛋白质并酶解制备抗氧化肽,对酶解产物分离纯化后得到抗氧化肽并对其序列进行鉴定,同时对其体外自由基清除能力,对H202损伤人内皮细胞(HAEC细胞)的保护活性以及降血糖作用进行了研究。论文主要包括以下内容:亚麻籽蛋白酶解最佳工艺研究。采用碱提酸沉法从亚麻籽粕中提取蛋白,以DPPH自由基清除率作为指标,选用胰蛋白酶为试验用酶,响应面法优化蛋白酶解工艺。最佳工艺条件为:底物浓度为2%(m/v),pH值8.50,加酶量4000U/g,温度37℃,酶解时间3.0h,其酶解产物(1.0mg/mL)的DPPH自由基清除率为63.64±0.93%。亚麻籽抗氧化肽的分离纯化及序列鉴定。采用Sephadex G-25凝胶过滤色谱、半制备型RP-HPLC和分析型RP-HPLC对酶解产物进行分离纯化,得到三个抗氧化肽,通过LC-ESI-MS/MS分析得到三个多肽的氨基酸序列和分子量分别为:Glu-Gly-Leu-Ala-Arg(EGLAR),544.39Da;Val-Phe-Ser-Val-Thr-Gly-Gly-Lys(VFSVTGGK),793.59Da;Tyr-Ala-Pro-Phe-Tyr-Leu(YAPFYL),772.49Da。抗氧化肽的体外活性表征。通过还原力、超氧阴离子自由基清除活性、活性氧自由基清除能力(ORAC)和ABTS自由基清除活性四个指标评价肽的抗氧化能力。结果显示,肽YAPFYL的整体抗氧化能力最强,有很强的还原力,并能有效地清除活性氧自由基和ABTS自由基。依次将肽YAPFYL中的芳香族氨基酸替换为甘氨酸,结果表明三个芳香族氨基酸对抗氧化均有重要贡献,Tyr对多肽抗氧化能力的影响大于Phe,且多肽中Tyr处于N端时活性更强。抗氧化六肽YAPFYL对H2O2损伤HAEC细胞的保护效应及降血糖探究。以不同浓度的六肽处理HAEC细胞,结果表明浓度达到0.5 mg/mL的六肽并未对细胞产生毒性作用,并且终浓度为0.25mg/mL和0.5mg/mL的六肽对细胞有明显的保护作用,由DCFH-DA荧光染色法测得六肽可降低细胞内ROS水平,降低细胞氧化损伤程度。此外,在六肽降血糖研究中发现,其并不具备抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力,在改善细胞胰岛素抵抗方面也未起作用。