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目的:建立糖尿病口干症大鼠模型,观察糖尿病涎腺结构和功能改变及口腔菌群改变等,并采用青蒿琥酯干预分析其对糖尿病口干症及口腔菌群的影响作用。方法:取6周龄雄性SD大鼠40只,其中,随机抽取8只作为正常对照组(Normal),另32只采取腹腔注射链脲佐菌素构建1型糖尿病大鼠模型,2周后血糖均稳定高于16.7 mol/L者视为糖尿病建模成功,将获得的糖尿病大鼠随机分为4组,每组8只;纳入实验。治疗干预开始后,胰岛素治疗组(DM+INS)给药方式为腹部皮下注射(每只每天6 U/kg),青蒿琥酯干预组(DM+ART)给药方式为灌胃(每只每天一次),DM+ART50mg/kg组剂量为50 mg/kg体重,DM+ART 100 mg/kg组剂量为100 mg/kg体重,DM组及正常对照组不做干预处理。实验期间每周测大鼠体重及空腹血糖值。干预第4周末,测各组大鼠12小时摄食、饮水、尿量及粪便量;检测刺激状态下大鼠5分钟唾液流率(毛果芸香碱,5 mg/kg);取各组大鼠口腔拭子,提取总DNA后扩增16S sRNA V3+V4区以97%一致性聚类并基于Silva数据库进行物种注释,研究各组大鼠口腔菌群改变。实验结束时处死所有动物,腹主动脉取血行实验室检查,并收集各组大鼠颌下腺、颊粘膜、舌及胰腺观察其组织学改变;免疫组织化学法及PCR分析水通道蛋白(AQP5)、诱导型一氧化氮合酶(NOS2)等在大鼠颌下腺组织中的分布和表达水平;透射电镜观察颌下腺腺泡细胞的超微结构改变。结果:l、实验结束时,正常对照组大鼠平均体重显著高于其他所有组(P<0.05);DM+INS 组和 DM+ART 50 mg/kg 组均显著高于 DM 组。2、终末血糖值Normal组为6.0±0.5 mmol/L显著低于其他所有组,DM组血糖值最高(39.5±7.2 mmol/L),DM+INS组(26.1±3.8 mmol/L)和DM+ART 100 mg/kg组(29.9±3.6 mmol/L)血糖值显著下降(P<0.05)。3、糖尿病大鼠饮水量(124.63±17.45 ml)明显增多,青蒿琥酯干预后饮水量均减少(P<0.05)。4、DM组刺激性唾液流率为1.5±0.73 μl/min显著低于Normal组41±25.57μl/min,干预4周后均明显增高(P<0.05),其中DM+ART 50 mg/kg组唾液分泌改善效果最佳为22.78±5.57 μl/min;5、糖尿病大鼠口腔菌群改变明显,如变形杆菌急剧升高至正常大鼠的约两倍(P<0.05);用药干预后各组口腔菌群有不同程度改变,其中DM+ART50 mg/kg组大鼠口腔前5种优势菌中菌群比例与正常组最接近。6、HE染色结果颌下腺:DM组颌下腺腺泡细胞缩小,呈簇状堆积,且胞浆中可见散在空泡,分泌颗粒明显固缩;DM+ART50 mg/kg组和DM+INS组腺泡细胞萎缩堆积情况改善明显,分泌颗粒饱满。颊粘膜:DM组大鼠颊粘膜变薄,棘层细胞减少,颗粒层近消失,基底细胞失去极性;青蒿琥酯干预后棘层细胞均有增加,基底细胞部分极性消失;DM+INS组出现上皮钉突指状深入固有层。舌部:DM组舌侧缘菌状乳头萎缩呈“尖锥样”,顶部角质层增厚。舌腹粘膜上皮角化层增厚明显,钉突呈锯齿状深入粘膜固有层,颗粒层细胞轻度肿胀,棘层增生;DM+INS组和DM+ART 100 mg/kg组舌侧缘菌状乳头萎缩程度改善,顶部角质层变薄。DM+ART 100 mg/kg组舌腹粘膜上皮钉突异常增生情况有所改善。7、IHC和PCR结果正常大鼠颌下腺腺泡细胞中AQP5呈高表达,阳性表达位置集中于细胞膜上;糖尿病大鼠AQP5表达显著下降(P<0.05);胰岛素干预后表达升高,但表达部位弥散于胞浆,而胞膜上阳性率依然较低;低剂量青蒿琥酯干预后AQP5表达效果最接近正常。RT-PCR的结果也提示在糖尿病大鼠中,低剂量青蒿琥酯干预后AQP5 mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),但仍低于Normal组。NOS2 mRNA在正常和糖尿病未干预组中相对表达量无明显差异,但青蒿琥酯干预后表达均显著升高(P<0.05)。8、超微结构观察DM组大鼠颌下腺腺泡细胞核固缩呈异形性,胞质可见大量溶酶体,内质网扩张明显,线粒体形态肿胀,线粒体嵴结构断裂破坏,可见自噬溶酶体;DM+ART50 mg/kg组核异形性明显改善,线粒体数目明显增多,线粒体嵴清晰可见,粗面内质网发达且明显增多;DM+ART 100 mg/kg组胞质内可见溶酶体散在分布。DM+INS组改善不明显。结论:1、糖尿病大鼠唾液分泌量明显降低,且颌下腺组织腺泡细胞结构发生了破坏;2、青蒿琥酯可能有一定的降血糖作用,且降糖作用与使用剂量相关,高剂量青蒿琥酯较低剂量青蒿琥酯降糖作用更强。3、青蒿琥酯干预能够改善糖尿病大鼠刺激性唾液的分泌;适当剂量的青蒿琥酯干预可能对糖尿病大鼠颌下腺细胞有保护作用。4、青蒿琥酯干预能明显提高糖尿病大鼠颌下腺中AQP5 mRNA和蛋白的表达和转运;青蒿琥酯应用对糖尿病大鼠颌下腺中的氧化应激可能无明显改善。5、正常与糖尿病大鼠口腔优势菌的差异较大,糖尿病大鼠口腔菌群中变形杆菌升高最明显;低剂量青蒿琥酯干预后口腔优势菌接近正常组。