以HBcAg为基础的肝细胞癌治疗性疫苗的构建、表达和纯化

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原发性肝细胞癌(Primary Hepatocellular Carcinoma PHCC)是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一,在我国发病率和致死率极高。目前针对PHCC的手术、放疗、化疗等各种临床治疗方法的效果均不理想。近年来,随着对肿瘤生物学认识的逐步加深和疫苗的迅速发展,以治疗性疫苗的应用为主的生物免疫治疗成为当前生物医学治疗PHCC的研究热点领域之一。MAGE-A3是黑色素瘤抗原MAGE-A家族成员之一,这类抗原的特点是:在很多肿瘤中都有表达,其中在PHCC中呈高表达,但在正常组织中除睾丸和胎盘外均不表达,被认为是肿瘤特异性抗原。乙肝病毒核心抗原(HBcAg),由于其独特的生物学结构和免疫学性质被人们认为是一种良好的分子载体。本研究选用表达载体ptrc,该载体是利用基因工程技术对HBcAg基因e1区进行了修饰,使其变为能够良好递呈外源基因的分子载体。将编码黑色素瘤抗原MAGE-A3 T细胞表位的基因序列插入该区,构建了含有HBcAg和MAGE-A3 CTL表位基因的原核表达载体ptrc-pep。在大肠杆菌中表达后,经蔗糖密度梯度超速离心纯化得到融合蛋白ptrc-pep。蛋白鉴定结果显示,融合蛋白ptrc-pep分子量约为26kDa,能够与抗-HBc抗体特异性结合。ptrc-pep可能发展成为一种兼有预防和治疗作用的新型肝癌疫苗。
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