蚯蚓是一种古老的中药，在临床上用于治疗脑血栓、高血压、支气管哮喘，以及治疗烧伤、烫伤、下肢溃疡等。现代医学研究认为：蚯蚓具有促进组织再生、免疫识别、抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、抗菌消炎的作用。80年代日本学者首次从蚯蚓中提取出具有极高活性的蚓激酶，至今研究人员已先后从蚯蚓组织中分离纯化出了胶原酶、胆碱酯酶、过氧化氢酶、纤溶酶等；具有抗菌作用的溶菌酶、抑菌肽；及多种蛋白质类物质：蚯蚓钙调素结合蛋白、抗微生物蛋白、收缩血管蛋白等。此外蚯蚓体中还含有丰富的微量元素。有关蚯蚓组织成分对创伤愈合的研究及促细胞增殖作用的研究是近来所关注的，但相关的研究还处于初期阶段，有文献报道，蚯蚓提取物具有促进成纤维细胞生长的作用。本研究首先应用生化技术手段，从蚯蚓组织中逐步分离提取出促上皮细胞增殖的组分以体外培养的小鼠成纤维细胞为检测对象，进行活性测定，同时采用实验病理学的方法，观察蚯蚓提取物对小型猪修复性牙本质形成作用的影响，探讨将蚯蚓提取物用于牙齿活髓保存的可能性，并为蚯蚓组织成分的深入研究及临床应用打下基础。 本研究分两个部分：一、蚯蚓提取物促细胞增殖成分的测定将鲜活蚯蚓洗净、剪碎、匀浆、低盐缓冲液抽提、取得蚯蚓提取液，部分经冻干得蚯蚓提取物冻干粉。 将蚯蚓提取液经硫酸铵分段盐析、离子交换层析分离、Sephadex-G100凝胶层析，得到促进上皮细胞增殖的蛋白组分。每一步均以NIH3T3为检测对象，采用MTT法观察不同浓度的蚯蚓提取液对NIH3T3细胞增殖的影响，并以此指导分离提取的取舍。实验结果得到：促增殖作用强的组分位于Sephadex-G100层析第一峰，经SDS-聚丙烯酰胺电泳检测为以72000为中心的三条区带。体外实验证实蚯蚓组织中存在多种促进细胞增殖的蛋白质类物质，因其分子量较大，推测它不属于生长因子类物质，可能是与生长因子相关的蛋白质，或参与细胞生长调控作用的蛋白质分子。 二、蚯蚓提取物对小型猪牙盖髓的实验研究用蚯蚓提取物冻干粉作为实验组盖髓剂，对照组采用氢氧化钙作为盖髓剂，对小型猪健康牙进行直接盖髓。结果显示：蚯蚓提取物盖髓的牙齿，术后二周穿髓孔下方可见牙本质团块形成，未见到创面周围牙髓组织变性坏死。术后四周，实验牙均可见多量的牙本质团块形成，部分牙可见完整的牙本质桥形成，为骨样牙本质。术后十二周，可见完整的修复性牙本质桥形成，完全封闭穿髓孔，桥下方牙髓组织正常。对照氢氧化钙组，术后二周可见界面有炎症坏死区，有薄层的钙化团块成桥形分布。术后一月、三月时逐渐形成修复性牙本质桥。 通过以上两部分实验研究表明：蚯蚓提取物中存在促进上皮组织细胞增殖的蛋白质类物质。通过活体实验提示用蚯蚓提取物盖髓，对牙髓刺激小，具有良好的生物相溶性，可诱导牙髓细胞分化及修复性牙本质的形成。提示蚯蚓提取物用于活髓保存是可行的，具有一定的临床应用价值。