CD4~+CD25~+Tregs在急性白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

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目的:通过分析CD4~+CD25~+调节性T细胞(CD4~+CD25~+ regulatory T cells,CD4~+CD25~+Tregs)在急性白血病(acute leukemia ,AL)患者化疗前后外周血中的比例和变化规律,并观察急性淋巴细胞白血病患者外周血血清对正常人的调节性T细胞的影响,初步探讨CD4~+CD25~+Tregs在急性白血病免疫抑制中的作用,为临床肿瘤免疫治疗提供一条新途径,从而更有效得干预疾病。方法:首先采用流式细胞仪分别检测43例急性白血病初治患者、25例经化疗完全缓解(complete remission, CR)者及20例健康志愿者外周血中CD4~+CD25~+T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR分析各组外周血中转录因子Foxp3 mRNA的表达水平,并逐层分析比较各组间的差异。同时采集正常人外周血单个核细胞,实验组加初治急性淋巴细胞白血病(ALL)患者血清,对照组加正常人血清,并分别设浓度梯度进行单个核细胞的培养,72 h后采用流式细胞仪、荧光定量RT-PCR分别检测CD4~+CD25~+T细胞和Foxp3 mRNA表达。以Foxp3基因的表达作为检测CD4~+CD25~+Tregs的特异性指标,分析比较各组间的差异。结果:AL化疗缓解组CD4~+CD25~+T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于AL初治组和对照组(P<0.01),后两者之间CD4~+CD25~+T细胞水平无明显差异(P>0.05),但AL初治组Foxp3mRNA含量较对照组明显升高(P<0.01);而急性非淋巴细胞白血病(ANLL)与ALL组内比较CD4~+CD25~+T细胞的比例及Foxp3mRNA均无明显差异(P>0.05),其各亚型之间因收集病例过少未予比较;血清培养对照组CD4~+CD25~+T细胞水平及Foxp3 mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论:CD4~+CD25~+Tregs在急性白血病患者外周血中比例明显升高,且体外实验研究初步表明ALL患者血清中存在某种可溶性成份可诱导外周血CD4~+CD25-T细胞转化为CD4~+CD25~+Tregs,提示CD4~+CD25~+Tregs可能是急性白血病免疫抑制的一个重要原因。
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