论文部分内容阅读
一、 天然免疫与Toll样受体的研究天然免疫是宿主抗感染的第一道防线。它既是最古老但又是最年轻、并重新受到重视的免疫防御系统。天然免疫存在于多细胞生物中，包括植物与昆虫。巨噬细胞是天然免疫中一类十分重要的效应细胞, 在天然免疫和获得性免疫中起关键的桥梁作用。它不仅在机体识别和消灭病原体中发挥重要作用，而且也是一类重要的抗原递呈细胞，通过细胞因子的分泌和共刺激分子的表达等方式调节特异免疫反应。TLRs是天然免疫识别各种病原体分子结构的眼睛。本文在简单介绍什么是天然免疫的基础上，综述了TLRs的免疫生物学功能，并研究了TLR2和TLR4在髓样白血病细胞分化过程中的表达动力学，并对实验结果进行了讨论。我们发现，用10nM PMA处理HL?60细胞24小时，TLR2和CD14 mRNA表达呈进行性的上升趋势。相反，在我们实验条件下，VitD3只能诱导CD14的表达，而是不能诱导TLR2表达的。我们还观察到，TLR4的表达在分化前后是没有什么变化的，它们是组成性表达的。进一步的研究表明，PMA诱导TLR2和CD14 mRNA的上调可被蛋白激酶C(PKC)的特异抑制剂Calphostine C所抑制，提示TLR2和CD14 mRNA的表达是PMA诱导依赖的。二、应激、NF??B和IL?12的研究应激的分子生物学是现代生物科学中一类十分热门的研究领域[1]。尽管这门学科的发展历史悠久，但其研究的根本宗旨仍然是去探索活细胞或生物体在环境、生理与病理条件下诱导应激反应的分子本质。细胞应激反应是活细胞和机体在进化中保留下来的、对环境中物理、化学和生物等诸多外界因素所产生的保护性反应。其主要作用是通过诱导热休克蛋白(HSPs)和其它分子，提供对细胞和生物体的保护性反应。热休克蛋白也叫作应激蛋白[1]。根据其分子量，大致可分为六大家族，即分子<WP=4>量从14kDa到29kDa 的小热休克蛋白家族、HSP40家族、HSP60家族、HSP70家族、HSP90家族和HSP110家族。迄今为止，HSP70是热休克蛋白家族中研究最多和最受重视的一类蛋白质。NF??B/Rel家族是一个大的转录因子家族，它可由同源的P50或与c?Rel同源的杂二聚体分子所组成。它是天然免疫和获得性免疫反应中，启动许多基因表达的转录因子[2-4]。IL?12是单核/巨噬细胞和树突状细胞产生的细胞因子，它是天然免疫细胞经TLRs识别微生物后分泌的重要细胞因子。诱导NK细胞和T细胞激活产生IFN??，激活单核?巨噬细胞抗感染和抗肿瘤的效应。此外，IFN??还能增强??细胞和CTL细胞的细胞溶解功能和促进获得性免疫中Th1细胞的发育。因此，IL?12被成为天然免疫和获得性免疫之间的桥梁。我们在上述学科的发展和本实验室原有工作的基础上, 探索了43℃热休克反应对小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞的NF??B活性和IL?12表达的影响。研究发现，热休克显著地抑制了LPS诱导的IL?12 p40 mRNA表达和p70蛋白分泌。NF??B的DNA结合活性在热休克细胞中明显下降，同时，LPS的刺激不能引起热休克细胞中I?B?的降解，这提示NF??B活性下降与I?B?降解的抑制密切相关。为了进一步探索热休克后，细胞内NF??B对IL?12启动子下游报告基因调节的影响，应用瞬时转染技术，发现热休克处理后，显著抑制了RAW264.7细胞对LPS触发的，IL?12 p40启动子控制下的荧光素酶报告基因的活性。这些数据进一步支持了热应激引起的IL?12表达的抑制直接与NF??B活性的缺失有关。1． Grover A. Molecular biology of stress responses. Cell Stress Chaperones. 2002, 7: 1-5.LI CL，Wang XY, Shao J, Zhang JS, Feng WG, Wang YB, Chang ZL. Heat shock inhibits IL-12 p40 expression through NF-?B signalling<WP=5>2． pathway in murine macrophages. Cytokine. 2001, 16:153-9.3． 张劲松, 王兴宇，单佑安，张宗梁。转录因子NF??B研究进展。科学通报，2002, 47: 323~329。4. Abbas, A.K., Lichtman, A. H., Pober, J. S. Cellular and Molecular Immunology. Fourth Edition. 2000, W.B. Saunders Company.page 483.