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近年来，抗体药物偶联物(ADC)引起了抗肿瘤抗体药物研究领域专家的广泛关注。ADC主要包括抗体、接头(linker)以及药物3部分。有多种方法用于制备抗体药物偶联物。抗体上有限的几个链间二硫键为抗体与药物的连接提供了很好的位点。采用二硫键进行药物连接的偶联物可以由两个步骤来完成：抗体链间二硫键的还原；与带有接头的药物的偶联。本论文采用分子排阻色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）两种方法来检测抗体还原后产物，通过实验发现，采用SDS-PAGE的方法可以将抗体以及抗体还原后的产物很好的分离，可以作为优化抗体还原反应条件的一种检测方法。同时本文对两种还原剂还原抗体的动力学进行了研究，发现抗体重链与轻链间的二硫键比抗体重链与重链间的二硫键更容易还原。反应温度、反应pH、还原剂与抗体的摩尔比是影响还原剂还原抗体的反应的三个因素，采用响应面法进行试验设计，由实验结果得出，还原剂与抗体摩尔比对HC-LC的产率影响最为显著，其次为反应温度，最后为反应pH。通过不断改变抗体与还原剂比例，从九种具有不同反应参数的还原剂来进行筛选试验，研究数据表明巯基乙醇（DTT）、巯基乙胺、乙酰半胱氨酸（Ac-Cys）和三(2-甲酰乙基)膦盐酸盐（TCEP）在一定的比例还原IgG时显示出一定的选择性，当DTT/IgG=2，巯基乙胺/IgG=50，TCEP/IgG=0.5和Ac-Cys/IgG=3时，相应的HC-LC比例分别是30.4%、26.5%、25.8%和29.5%。由实验结果得到最优反应温度为37℃，最优反应pH为7~8之间。将还原后的抗体与带有马来酰亚胺接头的药物反应，进行抗体药物偶联物制备实验。偶联反应在优化的还原反应参数下进行，并且采用疏水层析和反相液相色谱分析对产物进行鉴定，确定了每个抗体上平均偶联上了接近四个药物的最优反应条件。