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第一部分超脉冲CO2点阵激光不同能量密度和扫描密度对SD大鼠皮肤胶原影响目的:为进一步提高超脉冲CO2点阵激光治疗皮肤老化的效果,研究不同能量密度和扫描密度下超脉冲CO2点阵激光对SD大鼠皮肤胶原的影响。方法:46只SD大鼠按照随机数字表随机分为激光干预组40只、空白对照组6只。激光干预组中每只SD大鼠以背部皮肤中线为界分为左右两侧,根据扫描密度的不同左侧为A组(扫描密度25MTZs/cm2),右侧为B组(扫描密度100MTZs/cm2);A组、B组能量密度设置4个能量值,分别为30m J/cm2、60m J/cm2、120m J/cm2、150m J/cm2,依次标记为A1、A2、A3、A4组和B1、B2、B3、B4组;空白对照组为C组,不进行激光干预。分别于激光干预后即刻、2W、8W、12W随机抽取10只进行取材,行HE染色和Masson染色;激光干预后第12W测量组织切片中真皮厚度和真皮胶原纤维二维空间比值。结果:肉眼观察:激光干预后即刻出现阵列样损伤区,皮肤轻度红肿,A组干预区内各MTZ之间可见明显正常皮肤,B组干预区内MTZs之间未见明显正常皮肤;激光干预后第2W,各组均已完全脱痂,脱痂后皮肤微红,有明显点状凹陷;激光干预后第8W,干预区点状凹陷均消失。HE染色:激光干预后即刻,在A组中A1见MTZs表皮坏死、结痂,损伤深度达真皮浅层,MTZs区间可见明显正常皮肤结构,A2、A3、A4随能量密度增大,损伤深度越深;B组中B1见MTZs表皮坏死、结痂,损伤程度较A1轻,组织凝固染色浅,MTZs区间正常皮肤结构间距离缩小,B2、B3、B4随能量密度增加,组织凝固深染,区间正常皮肤开始结构不清或基本连续成片、损伤深度加深,真皮层可见明显裂隙。激光干预后第2W,各组表皮均完整A2、A3、A4、B2、B3、B4中毛囊、皮脂腺周围可见新生胶原纤维;激光干预后第8W,各组真皮新生的胶原纤维逐渐呈带状修复,可覆盖到原先未被激光束所照射的区域;激光干预后12W测量真皮层厚度发现:A2、A3、A4、B2、B3、B4与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在A组中各组真皮厚度分别为734.95±30.66μm、761.10±26.93μm、782.21±21.23μm、823.02±18.19μm,各组间进行两两比较均P<0.05;在B组中各组真皮厚度分别为729.03±36.43μm、770.84±14.64μm、811.52±16.25μm、841.85±31.65μm,各组间进行两两比较均P<0.05;多元方差分析发现能量密度、扫描密度对真皮层厚度均匀影响(F=13.67,P=0.000;F=6.25;P=0.023;P<0.05),能量密度的影响更显著。激光干预后第12W测量真皮胶原纤维二维空间比发现:A2、A3、A4、B2、B3、B4与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05),A3与A4比较、B3与B4比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:超脉冲CO2点阵激光不同能量密度和扫描密度均对真皮胶原纤维的合成有促进作用,且能量密度和扫描密度越大作用越强;能量密度较扫描密度对真皮胶原纤维合成的影响更显著。第二部分超脉冲C02点阵激光联合多极射频对SD大鼠皮肤影响的研究目的:探讨超脉冲CO2点阵激光联合多极射频对SD大鼠皮肤的影响。方法:40只SD大鼠背部脱毛后,以背部中线与垂直线交叉将其分为4个区域,分别为A组(空白对照组)、B组(超脉冲CO2点阵激光组)、C组(多极射频治疗组)、D组(超脉冲CO2点阵激光联合多极射频组)。分别于每组治疗结束后第2W、4W、8W、12W进行取材,行HE染色、Masson染色、III型胶原蛋白免疫组化、VEGF免疫组化。结果:肉眼观察:B组、D组予超脉冲CO2点阵激光干预后第2W结痂完全脱落,治疗区可见点状凹陷;干预后第8WB组、D组干预区点状凹陷消失,未见瘢痕、色沉等不良反应;HE染色中,干预后第2W,B组、C组、D组真皮层毛囊、血管周围开始出现新生胶原胶原,纤维细弱;干预后第4W,B组、C组、D组真皮浅层有明显胶原纤维重排,呈带状分布;干预后第8W,B组、C组、D组真皮胶原纤维排列规则、致密。测量真皮厚度发现:干预后第8W,B组、C组、D组较A组明显增厚,差异有统计学意义(P<0.05);干预后第12W,B组、C组、D组较A组明显增厚,差异有统计学意义(P<0.05),D组真皮增厚较其他组更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。Masson染色:干预后第8W、12W,B组、C组、D组胶原纤维二维面积比值较A组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),D组胶原纤维二维面积比值更大,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化Ⅲ型胶原纤维:干预后第2W,B组、C组、D组III胶原纤维合成均增多;干预后第4W,B组III胶原纤维合成较2W时有下降趋势,但仍强于A组表达,C组、D组表达持续增多,联合治疗更明显(P<0.05);干预后第8W各B组、C组、D组同A组比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化VEGF:分别在干预后第2W、4W、8W时,B组、C组、D组VEGF表达平均光学密度与A组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),D组较其他组更显著;干预后第12W,C组、D组同A组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:超脉冲CO2点阵激光联合多极射频治疗较单纯超脉冲CO2点阵激光、单纯多极射频对真皮胶原纤维的合成作用更显著;多极射频较超脉冲CO2点阵激光对真皮胶原纤维的合成作用更显著;多极射频、超脉冲CO2点阵激光联合多极射频较超脉冲CO2点阵激光使真皮血管内皮细胞VEGF表达上调持续时间长,且联合组对VEGF表达上调更明显。