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目的:伴有全血细胞减少的系统性红斑狼疮(SLE)患者,目前临床缺乏有效治疗方法。本课题拟研究骨髓间充质干细胞(BMMSCs)N-钙黏蛋白(N-Cadherin)对MRL/lpr狼疮鼠成骨及造血的影响,为SLE全血细胞减少提供新的理论依据,为治疗提供新的靶点。方法:(1)qRT-PCR检测C57BL/6鼠和MRL/lpr鼠BMMSCs N-cadherin的mRNA表达差异;(2)qRT-PCR检测MRL/lpr鼠BMMSCs成骨诱导前后N-cadherin表达差异;(3)qRT-PCR检测C57BL/6鼠和MRL/lpr鼠BMMSCs成骨指标(Col1A1、ALP、Run2、OCN)的差异;(4)C57BL/6鼠和MRL/lpr鼠BMMSCs成骨诱导2周后qRT-PCR检测两组成骨指标的差异;(5)构建慢病毒,转染细胞,下调MRL/lpr鼠BMMSCs的N-cadherin的表达,流式筛选GFP绿色荧光阳性的细胞,采用qRT-PCR鉴定出低表达组;(6)取两组细胞(MRL/lpr小鼠BMMSCs,shRNA慢病毒侵染BMMSCs)成骨诱导2周,诱导为成骨细胞(OB),qRT-PCR检测感染前后成骨指标的差异;(7)10只MRL/lpr小鼠,实验分组为2组,每组5只MRL/lpr小鼠,分别为尾静脉注射PBS狼疮鼠组、尾静脉注射N-Cadherin shRNA慢病毒感染后BMMSCs狼疮鼠组,20周龄处死,眼球取外周血,血细胞检测仪检测各组小鼠血常规差异。流式细胞术分析骨髓、脾脏细胞各系的比例,集落形成试验检测骨髓、脾脏集落形成数的差异。结果:(1)MRL/lpr狼疮鼠BMMSCs表面粘附分子N-cadherin mRNA的表达量明显高于对照组C57BL/6小鼠(P<0.05,n=5);(2)MRL/lpr狼疮鼠BMMSCs成骨诱导2周后N-cadherin mRNA的表达高于对照组(p<0.001,n=5);(3)MRL/lpr狼疮鼠BMMSCs的COL1(P<0.05,n=5)、RUNX2(P<0.001,n=5)的mRNA表达量低于C57BL/6小鼠;(4)狼疮鼠OB的(COL1、ALP、OCN)的mRNA表达量低于C57BL/6小鼠(P<0.05),RUNX2(P<0.01)的mRNA表达量低于C57BL/6小鼠,(5)qRT-PCR结果显示:相比BMMSCs正常组和NC组,shRNAN组N-Cadherin的表达明显下降(p<0.001,n=5);(6)两组细胞(MRL/lpr小鼠BMMSCs,shRNA慢病毒侵染BMMSCs)成骨诱导为OB,qRT-PCR检测结果显示:狼疮鼠OB的RUNX2的mRNA表达量较感染前明显增加(P<0.001,n=5),COL1、ALP、OCN的mRNA表达量较感染前有增加趋势;(7)尾静脉注射移植结果显示:较PBS组,BMMSCs组WBC、RBC、HB、PTL计数均有所增加,但无统计学意义;骨髓和脾脏流式结果显示:较PBS组,BMMSCs组B220+B淋巴细胞(P<0.05,n=5)、CD138+浆细胞比例(P<0.05,n=5)下降,差异有统计学意义,较PBS组,BMMSCs组Ter-119+红系,CD3e+T淋巴细胞,CD11b髓系比例未见明显异常;骨髓集落结果显示:较PBS组,BMMSCs组CFU-pre-B(P<0.05,n=5)下降,差异有统计学意义;较PBS组,BMMSCs组BFU-E、CFU-GM未见明显异常;脾脏集落结果显示:较PBS组,BMMSCs组BFU-E、CFU-GM未见明显异常。结论:(1)MRL/lpr狼疮鼠BMMSCs表面粘附分子N-Cadherin的表达量明显高于C57BL/6小鼠;MRL/lpr狼疮鼠OB的N-Cadherin的表达高于对照组;(2)MRL/lpr狼疮鼠的成骨能力低于C57BL/6小鼠;(3)下调N-Cadherin后,MRL/lpr狼疮鼠OB的N-Cadherin表达较下调前明显下降,MRL/lpr狼疮鼠OB的成骨能力增加;(4)下调BMMSCs N-Cadherin可抑制MRL/lpr狼疮鼠骨髓、脾脏B淋巴细胞、浆细胞的产生,改善贫血。