精索静脉曲张术后结合还元逐瘀汤治疗的实验研究

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背景与目的目前精索静脉曲张的术后疗效仍存有歧见,大多数学者认为手术治疗能改善精子质量,提高受孕率。但有的学者认为手术后未结合相应药物治疗是精索静脉曲张患者手术后仍不育的原因之一。De Rose AF等通过临床试验发现精索静脉曲张患者手术加使用促性腺激素治疗,无论是精液参数改善还是受育率方面均明显优于单纯手术组。国内也有较多报道认为手术加中药治疗的患者精液质量改善情况及受孕率均明显高于单纯手术组。国内张凤瑞曾报道少腹逐瘀汤有抑制大鼠肉芽肿的生成和抗炎作用,其抗炎作用是少腹逐瘀汤治疗淤血症的理论基础,王小流报道采用少腹逐瘀汤为主方结合手术及激素治疗精索静脉曲张并不育患者取得显著疗效。还元逐瘀汤是我们在少腹逐瘀汤基础上改良的经验方,用于治疗精索精脉曲张术后患者,经临床近30例病例的对照治疗观察,还元逐瘀汤具有明显改善临床症状的作用。本实验旨在了解精索静脉曲张术后结合还元逐瘀汤治疗的疗效及其毒副作用,并对静脉曲张术后结合还元逐瘀汤治疗所产生的睾丸生精功能及病理生理变化进行评估,为术后结合中药治疗疗效的判断提供更为可靠的实验依据。材料和方法雄性SD大鼠72只,8w。随机抽取12只作为假手术组,余下60只大鼠行第一步造模:部分结扎左肾静脉复制左侧精索静脉曲张模型。造模后再随机平均分为模型组、单纯高位结扎术(VT)组、结扎术后结合还元逐瘀汤低剂量组、中剂量组及高剂量组。每组大鼠12只。另外,假手术组只分离不结扎左肾静脉,不行左肾静脉缩窄处理。第二部造模,再按原分组对单纯高位结扎精索静脉组、结扎术后结合还元逐瘀汤治疗低、中、高剂量组共4组大鼠行左精索静脉高位结扎术处理,假手术组及模型组大鼠不再作左精索静脉高位结扎处理。给药:假手术组,按1ml/100g体重给予生理盐水每日1次灌胃;模型组:按1ml/100g体重给予生理盐水每日1次灌胃;VT组:按1ml/100g体重给予生理盐水每日1次灌胃;VT+还元逐瘀汤低剂量治疗组:按中药0.8g/100g体重给予每日灌胃1次;)VT+还元逐瘀汤中剂量治疗组:按中药1.6g/100g体重给予每日灌胃1次;VT+还元逐瘀汤高剂量治疗组:按中药4.0g/100g体重给予每日灌胃1次。各组大鼠于第二步造模完成后30天开始连续给药,持续60天。给药时间结束后开始进行指标检测:1.生育率:购72只10周龄雌性SD大鼠,分别与以上实验大鼠一一配对合笼5天,检测生育率;2.大鼠左侧睾丸质量;3.左附睾尾精液质量参数(精子密度、活力、活率)测定;4.TUNEL技术检测睾丸生精细胞凋亡;5.电镜观察睾丸组织超微结构。结果1.生育率模型组大鼠致孕能力明显下降,与假手术组、VT+还元逐瘀汤中、高剂量组比较有显著差异(P<0.05),但与VT组、VT+还元逐瘀汤低剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而VT组与VT+还元逐瘀汤中、高剂量组比较,有显著意义(P<0.05)。2.左侧睾丸质量模型组左侧睾丸质量明显减轻,与其他各组比较差异有显著性(P<0.01);VT组与VT+还元逐瘀汤低、中、高剂量组三组比较差异有显著性(P<0.01)。3.精子质量参数3.1精子密度模型组左侧附睾尾精子密度明显降低,与VT组、VT+还元逐瘀汤低剂量组比较差异有显著性(P<0.05);与其余各组比较差异有显著性(P<0.01)。而VT组与VT+还元逐瘀汤低剂量组比较差异无显著性(P>0.05);与VT+还元逐瘀汤中、高剂量组比较差异有显著性(P<0.01)。3.2精子活力、活率模型组精子活率、活力显著降低,与其余各组比较差异有显著性(P<0.01)。VT组与VT+还元逐瘀汤低剂量组比较差异无显著性(P>0.05);与VT+还元逐瘀汤中、高剂量组比较差异有显著性(P<0.01)4.睾丸生精细胞凋亡情况模型组与其他各实验组左侧睾丸生精细胞凋亡指数(AI)相互比较,差异均有显著性(P<0.01)。VT组与VT+还元逐瘀汤低、中、高剂量组比较,差异有显著性(P<0.01)。5.睾丸组织学观察模型组左侧睾丸组织的生殖细胞内出现染色质浓缩,断裂等超微结构改变。各组内生精细胞可见凋亡,凋亡的生精细胞胞膜和核膜裂解,核表明光滑、圆形的凋亡小体向细胞膜侧边移,睾丸间质细胞也发生凋亡。VT组、VT+还元逐瘀汤低、中、高剂量组与假手术组对较,睾丸生精细胞、支持细胞变化相对轻微。结论实验型精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠的生精功能,引起凋亡增加。行精索静脉高位结扎并术后配服还元逐瘀汤治疗能不同程度改善其生精功能,且作用效果优于单纯行高位结扎曲张精索静脉,这为其临床运用提供了客观的理论依据。
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