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本文研究目的:在中医药理论指导下,将地黄的传统功效和现代研究结合起来,通过动物实验,对地黄不同炮制品的滋阴和补血作用进行比较研究,探讨其作用机理。
研究方法:
1.采用小鼠灌服甲状腺片造阴虚模型,通过对小鼠体重、饮水量、血清T3、T4、血浆中cAMP、cGMP等指标的检测,观察地黄不同炮制品对阴虚模型小鼠的影响。
2.采用小鼠腹腔注射环磷酰胺250mg/kg造成血虚模型;通过对小鼠外周血象,骨髓细胞集落指标的检测,观察地黄不同炮制品对环磷酰胺所致血虚小鼠的影响。
3.采用小鼠隔两日放血0.4ml,每日按100g.kg-1体重限食的综合方法造成血虚模型,通过对小鼠外周血象,骨髓细胞集落指标的检测,观察地黄不同炮制品对综合放血法所致血虚小鼠的影响。
研究结果:
1.地黄不同炮制品对甲亢型阴虚模型小鼠滋阴作用的比较研究模型小鼠出现烦躁不安、兴奋好斗、喜饮,4天左右精神萎靡、行动迟缓、体重减轻、竖毛、毛不光洁等表现;体重增加值显著降低;饮水量显著升高;血清中T3、T4含量有显著升高;血浆cAMP、cAMP/cGMP显著升高(P<0.01),cGMP降低。地黄不同炮制品均能显著增加阴虚小鼠体重(P<0.001),其中新生地增加阴虚模型小鼠体重效果最明显;地黄不同种炮制品对阴虚模型小鼠饮水量的增加均有明显抑制作用(P<0.001);新生地组显著降低阴虚小鼠血清中T3、T4含量,且新生地组降低阴虚小鼠血清中T3、T4含量优于生地组、清蒸熟地和酒蒸熟地;地黄不同炮制品均能降低阴虚小鼠cAMP、cAMP/cGMP,说明地黄不同炮制品能缓解cAMP、cGMP紊乱引起的阴虚症状。
2.地黄不同炮制品对环磷酰胺所致血虚小鼠补血作用的比较研究。
2.1地黄不同炮制品对环磷酰胺所致血虚小鼠外周血象的影响模型小鼠外周白细胞、红细胞和血红蛋白降低,均从造模后的第1d到18d显著低于正常对照组,其中自细胞在制模3d后降至最低点,然后短暂回升后又稍下降。生地在第9d显著升高外周白细胞(P<0.01);新生地在7d、9d显著升高外周白细胞(P<0.05);清蒸熟地在第3d、7d显著升高白细胞(P<0.05),且与酒炖熟地有显著差异;清蒸熟地、酒炖熟地在18d能显著升高外周红细胞数(P<0.01),且显著高于生地、新生地;新生地在第5d能显著升高外周血红蛋白(P<0.05)。
2.2地黄不同炮制品对环磷酰胺所致血虚小鼠骨髓造血祖细胞的影响模型组小鼠红系早幼、晚幼祖细胞(CFU-E、BFU-E)和粒系祖细胞(CFU-GM)的生成能力较正常对照组明显减弱(P<0.01),说明环磷酰胺造模后小鼠骨髓的造血能力受到抑制。新生地组、酒炖熟地能显著增加CFU-E、BFU-E,酒炖熟地对CFU-E、BFU-E生成能力的恢复显著高于其它各组;生地、新生地、清蒸熟地能增加CFU-GM,且显著高于酒炖熟地。
3.地黄不同炮制品对综合放血法所致血虚小鼠补血作用的比较研究。
3.1地黄不同炮制品对综合放血法所致血虚小鼠外周血象的影响模型组小鼠自造模之日起至造模结束,外周红细胞和血红蛋白与正常组比较均有显著差异。生地组、新生地组在给药3、9、15天时外周红细胞与模型组有显著差异;清蒸熟地组在给药3、6、15天时外周红细胞与模型组有显著差异;酒炖熟地组在给药3、6、9、15天时外周红细胞与模型组有显著差异;在3、15天时酒炖熟地组小鼠外周红细胞数显著高于新生地组、清蒸熟地组。酒炖熟地在给药3、9、15天时外周血红蛋白与模型组均有显著差异,清蒸熟地在给药9天时外周血红蛋白与模型组有显著差异。
3.2地黄不同炮制品对综合放血法所致血虚小鼠骨髓造血祖细胞的影响模型组小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM与正常组均有显著差异。生地组、清蒸熟地、酒炖熟地均有显著增加CFU-E;酒炖熟地能显著增加BFU-E。
研究结论:地黄的不同炮制品均有滋阴作用,以新生地作用为优。其作用机制可能是通过调节T3、T4、cAMP、cGMP的含量而达到滋阴作用。
地黄的不同炮制品均有补血作用,生地主要靠刺激粒系造血细胞升高外周白细胞数而达到补血作用;熟地主要通过刺激红系造血祖细胞升高外周红细胞而达到补血作用。