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大豆是重要的油料兼经济作物。大豆油中富含多不饱和脂肪酸,容易被氧化。油酸作为一种单不饱和脂肪酸,是大豆油的重要组成部分,它性质稳定、不容易被氧化,在人体的脂类代谢中能降低有害胆固醇,保持有益胆固醇,从而减缓动脉粥样硬化,有效预防心血管疾病发生的几率。因此,油酸含量是评价大豆油脂品质的重要指标,高油酸大豆育种是大豆品质育种的重要目标之一。在脂肪酸合成途径中,Δ12-脂肪酸脱饱和酶（FAD2）是催化油酸转化为亚油酸的关键酶。FAD2-1A和FAD2-1B基因主要在发育的种子中表达,并被认为在控制种子油酸含量中起着重要作用。本研究利用CRISPR/Cas9技术定向编辑控制油酸含量的两个关键基因GmFAD2-1A和GmFAD2-1B,创制大豆FAD2-1基因突变体,为高油酸育种提供了新的种质资源并创建了方法。主要研究结果如下:1.根据大豆GmFAD2-1A和GmFAD2-1B基因的序列,同时设计了3个分别由AtU3d、AtU3b和AtU6-1启动子驱动、长20 bp的guide RNA（gRNA）靶点以靶向编辑GmFAD2-1A和GmFAD2-1B基因的外显子区,并且将这3个靶点一起组装到pYLCRISPR/Cas9-DB载体上。利用农杆菌介导大豆子叶节的方法分别转化大豆材料华夏3号（H3）与东农50（DN50）,两种材料各获得了3株转基因植株;2.通过PCR技术及测序分析对T0代转基因大豆植株靶点编辑情况进行检测,分析所有转化材料的突变情况。经检测分析发现T0代H3与DN50转化植株中,两种材料都只有GmFAD2-1A基因发生编辑,H3与DN50的突变率都约为33%,都为单靶点突变;3.GmFAD2-1A-H3突变体和GmFAD2-1A-DN50突变体大豆株系在株高、主茎节数、单株分枝数、叶形、花色、种皮色、种脐色、生育期等方面分别与对照品种均没有明显差异,突变体大豆的蛋白和脂肪含量与对照品种也无显著差异,表明GmFAD2-1A基因的突变对转基因大豆的农艺性状表型没有影响,对大豆种子中总蛋白和总脂肪的积累也没有影响;4.GmFAD2-1A-H3突变体与GmFAD2-1A-DN50突变体中,油酸含量都得到极显著提高,其中GmFAD2-1A-H3突变体的油酸含量从20%提高到了23%,而GmFAD2-1A-DN50突变体的油酸含量从17.5%提高到了23%,分别提高了3%和5.5%。