AA和DHA在大鼠前体脂肪细胞增殖与分化中的调控作用

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  本文以生长发育正常、健康状况良好的20日龄雄性SD大鼠为实验动物,采用脂肪细胞离体培养技术分离培养大鼠前体脂肪细胞,以不同浓度的花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞,分析了AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并比较了不同浓度AA和DHA对前体脂肪细胞分化过程中过氧化物酶增殖物活化受体-γ2(PPAR-γ2)及环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA表达的调控,为进一步阐明AA和DHA两种多不饱和脂肪酸(PUFA)在脂肪细胞增殖与分化中的作用机理提供理论依据。利用台盼兰排斥试验、噻唑蓝比色法(MTT)、Hoechst33342荧光染色、流式细胞术测细胞周期法等实验技术分别检测了不同浓度AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞活力、细胞周期及凋亡的影响。   通过细胞形态观察、油红O染色、香草醛测总脂法和考马斯亮蓝测总蛋白等方法分析不同浓度AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。   采用半定量RT-PCR技术分析40μmol/L、160μmol/L两种浓度的AA和DHA对大鼠脂肪细胞中PPARγ2和COX-2mRNA表达的影响。
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