贵州苗药头花蓼rbcL/rDNA ITS序列测定及特征性成分(没食子酸)含量分析

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目的:分析贵州地区不同来源(野生和栽培)头花蓼的rbcL/rDNA ITS序列特征以及与没食子酸含量的相关性,旨在为头花蓼的分子生物学鉴定提供参考。方法:(1)以改良的CTAB法提取头花蓼的基因组DNA。(2)以通用引物分别对不同来源头花蓼的rbcL/rDNA ITS序列进行PCR扩增,并对扩增产物进行碱基序列测定。(3)运用Clustal X和DNAMAN软件对目的序列进行序列比对和聚类分析。(4)实验所得序列信息投递到NCBI,获得GenBank登录号。结果:(1)改良CTAB法可有效提取植物总DNA (OD260/OD280比值区间在1.1-2.0);(2)测序结果表明,rbcL序列长度在979-985bp之间,rDNA ITS序列长度为661-666bP;(3)序列比对和聚类分析结果表明,目的序列具有高度同源性;(4)测序结果提交NCBI获得GenBank序列号。结论:rbcL/rDNA ITS序列信息可作为分子水平鉴定头花蓼的参考依据。目的:测定不同产地头花蓼中没食子酸的含量。为头花蓼分子鉴定提供参考依据。方法:采用高效液相色谱法,DiamonsilC,8(4.6mm*250mm,5μm)为色谱柱;流动相为甲醇~0.2%磷酸(45:55),流速为1.0ml/min,检测波长350nm。结果:不同产地头花蓼中所含没食子酸的含量差异比较明显,在(0.22%~0.36%)之间。结论:不同来源头花蓼没食子酸含量经HPLC测定含量不同,能够为不同来源头花蓼分子水平的鉴定提供参考依据。
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