LY294002联合多柔比星对神经胶质瘤U87细胞凋亡的影响

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目的:通过体外实验观察LY294002和ADR联合应用对胶质瘤U87细胞的抑制效应,并与单纯使用LY294002或ADR的疗效相比较,从而探讨LY294002和ADR联合化疗胶质瘤U87细胞可行性,同时为LY294002和ADR在胶质瘤中的联合应用提供相应的理论依据。  方法:(1)四甲基偶氮唑盐[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2H tet razolium bromide,MTT]法检测LY294002和ADR单独或者联合作用胶质瘤U87细胞增殖的影响。(2)流式细胞仪检测LY294002和ADR单独或者联合作用细胞周期分布及凋亡。(3)应用RT-PCR和蛋白印迹(Westernblotting,WB)法检测LY294002和ADR单独或者联合作用U87细胞Bax、Bcl-2的表达情况。(4)倒置显微镜观察用LY294002和ADR单独或者联合作用U87细胞形态变化。  结果:(1)MTT、FCM结果显示,与对照组相比,LY294002和ADR单独或者联合作用对U87细胞的生长具有抑制作用,且两者联合后作用更强。(2)RT-PCR及Western-Blotting结果均显示,LY294002和ADR单独或者联合作用后,U87细胞中Bcl-2表达降低而Bax表达升高,联合后更显着。(3)倒置显微镜观察用LY294002和ADR单独处理后,胶质瘤细胞逐渐减少,体积变小,胞质透亮度下降,颗粒感增强,细胞突触变短、变圆,部分细胞胞突回缩变圆,脱落呈悬浮状,而ADR+LY294002联合处理的细胞,上述变化更加显着,并可见细胞形态破坏,胞膜破裂,细胞凋亡。  结论:LY294002和ADR能够抑制人胶质瘤U87细胞的增殖,两者联合使用具有协同作用。LY294002和ADR能够将人胶质瘤U87细胞阻滞在G0/G1期,两者联合使用阻滞作用增强,细胞凋亡更明显。LY294002通过促进Bax、抑制Bcl-2的表达增强人胶质瘤U87细胞对ADR的敏感性。
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